對(dui)(dui)蝦(xia)種(zhong)苗(miao)(miao)企業的(de)(de)生存主(zhu)要是依(yi)靠(kao)蝦(xia)苗(miao)(miao)養(yang)殖效果(guo)來決定的(de)(de)，蝦(xia)苗(miao)(miao)成(cheng)(cheng)活率的(de)(de)高(gao)低直(zhi)接(jie)影響著產業鏈的(de)(de)上(shang)上(shang)下(xia)下(xia)。單胞(bao)藻(zao)對(dui)(dui)于(yu)蝦(xia)苗(miao)(miao)早期是最適(shi)合的(de)(de)餌料，如(ru)果(guo)培育得當，不(bu)(bu)僅可(ke)以(yi)節約(yue)成(cheng)(cheng)本，減少育苗(miao)(miao)水(shui)(shui)體環境負(fu)荷，尤其是對(dui)(dui)于(yu)蝦(xia)苗(miao)(miao)的(de)(de)發(fa)育打(da)下(xia)堅實的(de)(de)基礎，提高(gao)成(cheng)(cheng)活率。結(jie)合個(ge)人的(de)(de)育苗(miao)(miao)感受，投(tou)(tou)喂單胞(bao)藻(zao)與不(bu)(bu)投(tou)(tou)喂的(de)(de)區別(bie)還是有(you)的(de)(de)，比如(ru)苗(miao)(miao)的(de)(de)變態時(shi)間縮短，活力個(ge)頭大小(xiao)，水(shui)(shui)質均優于(yu)未投(tou)(tou)喂單胞(bao)藻(zao)的(de)(de)苗(miao)(miao)，當然(ran)如(ru)果(guo)培育不(bu)(bu)得當，反作用也(ye)有(you)，比如(ru)投(tou)(tou)喂有(you)害菌超標的(de)(de)藻(zao)液(ye)，藻(zao)類(lei)老化，投(tou)(tou)喂過量等。所以(yi)合理運(yun)用，方可(ke)收到理想效果(guo)。限于(yu)個(ge)人水(shui)(shui)平，描(miao)述方法的(de)(de)錯誤不(bu)(bu)足(zu)之處，懇請大家(jia)指(zhi)正。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超(chao)凈工作臺
使(shi)(shi)用(yong)前提前開機，打開紫外線燈(deng)和風機開關(guan)20分(fen)鐘。超(chao)凈(jing)臺(tai)面上不(bu)(bu)存放不(bu)(bu)必要的(de)(de)物(wu)品(pin)，保持(chi)工作(zuo)(zuo)區內的(de)(de)凈(jing)化氣(qi)流(liu)不(bu)(bu)受干擾，工作(zuo)(zuo)時盡(jin)量(liang)避免(mian)作(zuo)(zuo)明顯(xian)干擾氣(qi)流(liu)的(de)(de)動作(zuo)(zuo)；超(chao)凈(jing)臺(tai)保持(chi)光滑(hua)水平，光滑(hua)便于(yu)用(yong)酒精(jing)消毒(du)布(bu)擦，水平是倒培(pei)養(yang)基(ji)時使(shi)(shi)培(pei)養(yang)皿內平板厚度一(yi)致(zhi)。工作(zuo)(zuo)時超(chao)凈(jing)臺(tai)周圍空氣(qi)流(liu)動要緩(huan)慢(man)，雜菌盡(jin)量(liang)減少(shao)(shao)，所以要定期清潔消毒(du)保種室內，關(guan)閉門窗，盡(jin)可能減少(shao)(shao)雜菌數量(liang)；空氣(qi)過濾網定期清潔。
（2）真空泵和溶(rong)劑(ji)過(guo)濾器及過(guo)濾膜
此環節(jie)過(guo)濾只是為單胞藻純培養室（保(bao)種(zhong)，提純，擴培試管級）準備清潔無(wu)菌海水。其他級別的培養無(wu)需此環節(jie)。
過(guo)(guo)濾(lv)膜使用(yong)0.2微米孔徑(jing)，不(bu)可用(yong)手拿，用(yong)鑷子選(xuan)取。真空(kong)泵與溶(rong)劑(ji)過(guo)(guo)濾(lv)器之間通過(guo)(guo)合(he)適口(kou)徑(jing)的(de)橡膠管連接(jie)緊密，每次過(guo)(guo)濾(lv)要注(zhu)意濾(lv)膜的(de)過(guo)(guo)濾(lv)效果，防止濾(lv)孔阻塞影(ying)響過(guo)(guo)濾(lv)效果。濾(lv)瓶內的(de)濾(lv)液(ye)(ye)不(bu)能沒(mei)過(guo)(guo)濾(lv)板出水口(kou)，否則(ze)濾(lv)液(ye)(ye)將(jiang)被抽吸入真空(kong)泵，導致真空(kong)泵損壞。
應該使(shi)濾(lv)板(ban)內的(de)營養液(ye)過濾(lv)盡后（無(wu)水滴）才能停泵(beng)。要定期注意真空泵(beng)內油(you)量(liang)，注意加油(you)。
(3) 恒(heng)溫鼓風干燥箱
設(she)(she)定(ding)溫(wen)度(du)時。先按控溫(wen)儀功能鍵SET進入溫(wen)度(du)設(she)(she)定(ding)狀態，此時SP設(she)(she)定(ding)顯示一閃(shan)(shan)一閃(shan)(shan)，要按移(yi)動位(wei)鍵配合加(jia)鍵或減鍵，設(she)(she)定(ding)時先從分位(wei)數字設(she)(she)定(ding)，一直到百位(wei)數，設(she)(she)定(ding)結(jie)束需按一下(xia)功能鍵SET,此時干燥箱(xiang)進入升溫(wen)狀態，加(jia)熱(re)指示燈(deng)(deng)亮(liang)，當箱(xiang)內溫(wen)度(du)接近設(she)(she)定(ding)溫(wen)度(du)時，加(jia)熱(re)指示燈(deng)(deng)閃(shan)(shan)動多次，控制進入恒(heng)溫(wen)狀態。
使用(yong)注意事項(xiang)：物品(pin)(pin)不(bu)能(neng)(neng)堆(dui)得太滿，更不(bu)能(neng)(neng)堵住出風口，以免影響(xiang)溫(wen)度均勻(yun)上升。若是有(you)牛皮紙和保鮮(xian)膜時(shi)，溫(wen)度不(bu)能(neng)(neng)超過180度。取出物品(pin)(pin)時(shi)，箱內(nei)外溫(wen)差不(bu)宜(yi)過高，防止(zhi)玻璃器皿炸裂。橡膠(jiao)制品(pin)(pin)不(bu)能(neng)(neng)放入。
（4）加濕(shi)器
配合(he)生化培養箱使用。
水(shui)(shui)源是(shi)蒸餾水(shui)(shui)；不(bu)應容器(qi)內帶水(shui)(shui)移動加濕器(qi)；加水(shui)(shui)時(shi)應在容器(qi)上表示的滿(man)水(shui)(shui)線為止。
應注意(yi)的事項(xiang)：平時(shi)留(liu)意(yi)觀察水箱的存水量，及時(shi)予(yu)以(yi)補(bu)充，遠離熱源，腐蝕物。
（5）蒸汽消毒器
容器加水時(shi)，水位一定(ding)要超過(guo)電(dian)熱(re)管，最(zui)好(hao)是到3個支撐(cheng)點的(de)(de)下緣(yuan)，如果連(lian)續(xu)使(shi)用，應在每次(ci)消毒前(qian)補足蒸發(fa)水量，不然少水會燒壞電(dian)熱(re)管。蓋上的(de)(de)放(fang)氣軟(ruan)管插入(ru)消毒桶(tong)圓槽(cao)內，對正蓋和主(zhu)體的(de)(de)螺栓槽(cao)，依(yi)次(ci)將(jiang)相對方的(de)(de)翼型螺母(mu)予以旋緊，使(shi)蓋與(yu)主(zhu)體密合，加熱(re)開始時(shi)，應將(jiang)放(fang)氣閥(fa)與(yu)安全閥(fa)的(de)(de)小手柄扳(ban)至垂(chui)直放(fang)氣方位，必須(xu)待有較急蒸汽噴(pen)出，即將(jiang)小手柄扳(ban)回水平“關閉(bi)”方位。
當(dang)到達(da)所需壓力和(he)溫度，計(ji)算(suan)消毒(du)時間，消毒(du)畢后，關閉(bi)電源(yuan)，待壓力指(zhi)(zhi)針指(zhi)(zhi)向0時，將(jiang)放(fang)(fang)氣(qi)閥的小(xiao)手(shou)柄扳至垂(chui)直放(fang)(fang)氣(qi)方(fang)位(wei)，氣(qi)放(fang)(fang)完后，打開容器蓋。物(wu)品消毒(du)后要迅速干燥。
應注意滅菌液體時(shi)(shi)，不(bu)超過盛液體容器(qi)體積的(de)3/4，瓶塞(sai)不(bu)可用軟(ruan)木(mu)塞(sai)或未打(da)孔的(de)橡膠塞(sai)。滅菌器(qi)內冷空(kong)(kong)氣(qi)(qi)(qi)必須完全排除。因為空(kong)(kong)氣(qi)(qi)(qi)的(de)膨(peng)脹壓(ya)(ya)大于水蒸氣(qi)(qi)(qi)的(de)膨(peng)脹壓(ya)(ya)，當水蒸氣(qi)(qi)(qi)含冷空(kong)(kong)氣(qi)(qi)(qi)時(shi)(shi)，壓(ya)(ya)力表所表示的(de)壓(ya)(ya)力是水蒸氣(qi)(qi)(qi)壓(ya)(ya)力和部(bu)分(fen)冷空(kong)(kong)氣(qi)(qi)(qi)壓(ya)(ya)力之和，不(bu)是水蒸氣(qi)(qi)(qi)的(de)實際壓(ya)(ya)力，而同一壓(ya)(ya)力下的(de)實際溫(wen)度，含空(kong)(kong)氣(qi)(qi)(qi)的(de)蒸汽(qi)低于飽和蒸汽(qi)，這樣導致(zhi)達不(bu)了消毒效(xiao)果。絕不(bu)可堵塞(sai)安全閥(fa)出氣(qi)(qi)(qi)孔，必須留空(kong)(kong)位保證其暢通(tong)放(fang)氣(qi)(qi)(qi)，發(fa)現超溫(wen)超壓(ya)(ya)，立即斷(duan)電。
蒸餾器
先關(guan)閉(bi)放(fang)水(shui)閥(fa)(fa)，打(da)開(kai)進水(shui)閥(fa)(fa)，待溢水(shui)皮管有水(shui)流出，方(fang)可接通電源(yuan)，此時可暫時關(guan)閉(bi)進水(shui)閥(fa)(fa)，待出水(shui)皮管有蒸餾水(shui)流出，打(da)開(kai)進水(shui)閥(fa)(fa)，制(zhi)備蒸餾水(shui)。定期清洗(xi)蒸餾器內壁，除去水(shui)垢，不然影響(xiang)蒸餾水(shui)質量和使用(yong)效果。切不可關(guan)閉(bi)水(shui)閥(fa)(fa)制(zhi)備蒸餾水(shui)，否則燒壞電熱管。
（6）鼓(gu)風機
定期更換吸氣口的過濾棉(mian)，異常(chang)情況，請電工(gong)檢查(cha)。
（7）空調
保(bao)種(zhong)室若有(you)生長藻種(zhong)，需維持恒(heng)定(ding)溫(wen)度，反之關閉(bi)。一級，二級空調視外(wai)界氣溫(wen)調整開關。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾(lv)水(shui)筒式過濾(lv)器。筒式過濾(lv)器的(de)(de)濾(lv)芯應(ying)用(yong)(yong)一次(ci)更換(huan)一次(ci)，用(yong)(yong)過的(de)(de)濾(lv)芯浸泡在1%鹽酸溶(rong)液中消毒(du)12h以上(shang)。然后用(yong)(yong)洗(xi)潔精清洗(xi)，再用(yong)(yong)足量清水(shui)沖洗(xi)干(gan)凈，晾(liang)干(gan)備用(yong)(yong)。（濾(lv)芯規(gui)格應(ying)小于等于0.5微米）。
2、試管(guan)(guan)（規格10毫(hao)升(sheng)(sheng)到20毫(hao)升(sheng)(sheng)），錐形(xing)瓶(ping)（50毫(hao)升(sheng)(sheng)到200毫(hao)升(sheng)(sheng)），500ml錐形(xing)瓶(ping)，2.5L瓶(ping)廣口瓶(ping)，移液(ye)管(guan)(guan)，移液(ye)槍(qiang)管(guan)(guan)/盒，玻璃氣(qi)管(guan)(guan)，膠(jiao)氣(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)石，溶(rong)劑(ji)(ji)過濾器，培(pei)養皿(min)。用(yong)(yong)過后(hou)(hou)應當用(yong)(yong)清(qing)(qing)(qing)水清(qing)(qing)(qing)洗(xi)后(hou)(hou)浸泡(pao)于(yu)1% 鹽酸12h以上（溶(rong)劑(ji)(ji)過濾器除外，浸泡(pao)時(shi)相近大小器皿(min)分(fen)類放不同的消(xiao)毒桶(tong)，規格相差(cha)大，易導致相互碰撞碎(sui)爛）然(ran)后(hou)(hou)用(yong)(yong)洗(xi)潔精(jing)清(qing)(qing)(qing)洗(xi)(用(yong)(yong)毛(mao)刷清(qing)(qing)(qing)洗(xi)試管(guan)(guan)底部(bu)時(shi)，不可太用(yong)(yong)力，否則底部(bu)易破(po)裂)，再(zai)用(yong)(yong)大量(liang)清(qing)(qing)(qing)水沖洗(xi)干(gan)(gan)凈，風(feng)干(gan)(gan)或曬干(gan)(gan)，高壓(ya)滅菌(jun)后(hou)(hou)，放入恒溫干(gan)(gan)燥箱（膠(jiao)氣(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)石除外）干(gan)(gan)燥備用(yong)(yong)。
3、聚乙(yi)烯藻(zao)(zao)袋用(yong)于(yu)二級藻(zao)(zao)類藻(zao)(zao)種掛袋培養或(huo)3級擴(kuo)培（一(yi)般使用(yong)盛(sheng)裝藻(zao)(zao)液12升(sheng)左右）。先用(yong)清水沖洗干(gan)凈內外，浸泡于(yu)1% 鹽酸12h以上，再用(yong)大(da)量清水沖洗干(gan)凈，風干(gan)或(huo)曬(shai)干(gan)，備用(yong)。由于(yu)藻(zao)(zao)袋近似(si)密封性，對于(yu)防止微生物(wu)污染有很好的效果。
4、毛(mao)巾(jin)、保種室，一級和二級毛(mao)巾(jin)不可混用，所用毛(mao)巾(jin)后(hou)都應消毒清洗晾干后(hou)備用。
5、錫(xi)箔紙：除(chu)非粘上油污或污物以及破損(sun)，都(dou)應重復使用。
6、牛皮紙：定期拿到(dao)烘箱烘干。
7、定期(qi)更換(huan)空氣過濾(lv)器（用于1，2級培養的(de)進氣過濾(lv)）的(de)濾(lv)芯，濾(lv)芯已油化(hua)或(huo)沖散的(de)棄(qi)去。
8、定期(qi)更換(huan)鼓(gu)風機進(jin)風口(kou)的過(guo)濾棉(mian)。
9、對新購入的(de)(de)器(qi)皿應先除去(qu)包裝沾染的(de)(de)污垢后，用洗(xi)潔精刷洗(xi)，流水(shui)沖(chong)凈，再浸泡(pao)于1%的(de)(de)鹽酸12h，使游離的(de)(de)堿性(xing)物質除去(qu)，再用清水(shui)沖(chong)洗(xi)干(gan)凈，風干(gan)或(huo)曬干(gan)備用。
室內衛生消毒
1、保(bao)種室每(mei)天早上用清水(shui)擦洗實(shi)驗臺面，地板，墻壁，木架后，開紫(zi)(zi)外燈(deng)消毒(du)20分鐘(zhong)，此時關掉(diao)(diao)空(kong)調，關掉(diao)(diao)日(ri)光(guang)燈(deng)，由于(yu)紫(zi)(zi)外燈(deng)照射會產生(sheng)一定量(liang)的臭氧，對(dui)人體有(you)害(hai)，所以消毒(du)關閉紫(zi)(zi)外燈(deng)后人應隔(ge)一段(duan)時間再進去。進保(bao)種室換鞋。
2、一級和(he)二級室每(mei)天清潔(jie)，接種(zhong)前接種(zhong)后承載物框架都應用(yong)消毒(du)液消毒(du)。
3、門口(kou)消毒池定(ding)期更換消毒藥水（高(gao)錳(meng)酸鉀）。
4、常用(yong)消(xiao)毒劑濃(nong)度 1%鹽(yan)酸，次(ci)氯酸鈉20ppm（有效氯），碘(dian)液（1000ppm）,酒(jiu)精70-75%,高錳酸鉀1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所需燒(shao)杯(bei)，玻(bo)棒須清洗(xi)干凈，錐形瓶和培(pei)養(yang)皿須消(xiao)毒清洗(xi)滅菌烘干。將稱好的(de)純化瓊脂粉加(jia)(jia)入燒(shao)杯(bei)再加(jia)(jia)入一定(ding)量的(de)海水，加(jia)(jia)熱(re)（必(bi)須不(bu)停攪拌，以免瓊脂糊底燒(shao)焦）至(zhi)完全融(rong)化，加(jia)(jia)熱(re)后的(de)瓊脂培(pei)養(yang)基(ji)應當透明無顯著沉淀，若(ruo)明顯，可采用清潔的(de)白色薄(bo)(bo)絨布(bu)或中(zhong)間(jian)夾有薄(bo)(bo)層吸水棉的(de)雙層紗布(bu)鋪在漏斗上趁熱(re)過濾，融(rong)化畢(bi)后精(jing)確(que)加(jia)(jia)入營養(yang)鹽（維生素B溶液須等培(pei)養(yang)基(ji)高(gao)壓滅菌后冷卻至(zhi)50攝氏度以下再加(jia)(jia)）。
培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基采用121攝氏度高壓(ya)蒸汽滅菌20至30分(fen)鐘即可，培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基滅菌后(hou)應立(li)即取出(chu)，冷卻(que)至50攝氏度以下(xia)，即加維生(sheng)素B溶液。將(jiang)盛裝(zhuang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基的錐形(xing)瓶(ping)和培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)皿放在超凈工作(zuo)臺上，點(dian)燃酒精燈，右(you)手托起錐形(xing)瓶(ping)底(di)，將(jiang)瓶(ping)口在酒精燈稍(shao)加燒，然(ran)后(hou)迅速將(jiang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基倒入培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)皿中，以鋪滿皿底(di)為止（厚薄適中）。鋪放好后(hou)，放置20-30分(fen)鐘，待(dai)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基凝(ning)固后(hou)，即開始操(cao)作(zuo)。
若是做斜面(mian)培養(yang)(yang)基，則加入維生(sheng)素B溶液后，將盛裝(zhuang)培養(yang)(yang)基的(de)(de)錐形(xing)瓶和試(shi)管(guan)以及一根厚(hou)約1厘米的(de)(de)小木(mu)板放在(zai)超凈(jing)工作臺上。分(fen)裝(zhuang)約為試(shi)管(guan)高度的(de)(de)1/3-2/3（視情況操作），分(fen)裝(zhuang)量應以能形(xing)成2/3底層和1/3斜面(mian)量為好(hao)，擺置成適當斜面(mian)，待其自然(ran)凝固。培養(yang)(yang)基制(zhi)備(bei)好(hao)后，如發現破裂，水(shui)分(fen)浸入，色澤異常等均應棄去.
待凝固(gu)后即(ji)進行操作，現一般采用(yong)平板劃線接(jie)種和涂布接(jie)種。
平板劃線接種
接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)環在(zai)(zai)(zai)酒(jiu)精(jing)燈火(huo)焰上(shang)(shang)充分(fen)燒紅后(hou)，接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)柄一(yi)(yi)邊(bian)(bian)轉動(dong)一(yi)(yi)邊(bian)(bian)慢(man)慢(man)來回(hui)通過火(huo)焰3次，待冷卻至室溫方(fang)可挑(tiao)取(qu)藻(zao)(zao)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)（為保證藻(zao)(zao)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)不(bu)(bu)被燙死(si)，挑(tiao)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)前可將接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)環接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)觸培(pei)養皿(min)(min)內壁(bi)(bi)或培(pei)養基(ji)），迅速(su)(su)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)至新培(pei)養基(ji)（劃(hua)線(xian)可采用(yong)(yong)(yong)斜線(xian)法(fa)，方(fang)格法(fa)，曲線(xian)法(fa)，放射(she)法(fa)等(deng)）。左手(shou)握住(zhu)平板(ban)(ban)，用(yong)(yong)(yong)大(da)拇(mu)(mu)指(zhi)(zhi)和(he)(he)食指(zhi)(zhi)稍稍抬起皿(min)(min)蓋，同(tong)時靠近火(huo)焰周圍，右(you)手(shou)持接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)環伸入皿(min)(min)內，在(zai)(zai)(zai)平板(ban)(ban)上(shang)(shang)一(yi)(yi)個區域作劃(hua)線(xian)（依(yi)方(fang)法(fa)不(bu)(bu)同(tong)，動(dong)作不(bu)(bu)同(tong)）。劃(hua)線(xian)時使接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)環與(yu)平板(ban)(ban)表面(mian)成30-40度角輕(qing)輕(qing)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)觸，以腕力在(zai)(zai)(zai)表面(mian)作較快的(de)滑動(dong)（注意不(bu)(bu)要劃(hua)破平板(ban)(ban)表面(mian)或伸進培(pei)養基(ji)內）。接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)環挑(tiao)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)后(hou)和(he)(he)劃(hua)線(xian)完(wan)(wan)抽出(chu)時均不(bu)(bu)可碰及皿(min)(min)壁(bi)(bi)/口(kou)，更不(bu)(bu)能(neng)碰其(qi)它物體(ti)和(he)(he)臺面(mian)。接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)完(wan)(wan)后(hou)，將接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)環從柄部至環端逐(zhu)漸通過酒(jiu)精(jing)燈火(huo)焰滅(mie)菌，不(bu)(bu)能(neng)直接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)燒環，以免殘(can)留在(zai)(zai)(zai)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)環上(shang)(shang)的(de)藻(zao)(zao)體(ti)或菌體(ti)爆濺污(wu)染(ran)空間。上(shang)(shang)述操作完(wan)(wan)成后(hou)，即用(yong)(yong)(yong)無菌封口(kou)膜(mo)封培(pei)養皿(min)(min)口(kou)（膜(mo)使用(yong)(yong)(yong)前須用(yong)(yong)(yong)酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒，紫外燈消(xiao)毒，風干），封口(kou)時，用(yong)(yong)(yong)左手(shou)大(da)拇(mu)(mu)指(zhi)(zhi)摁(en)住(zhu)膜(mo)一(yi)(yi)邊(bian)(bian)末端，右(you)手(shou)大(da)拇(mu)(mu)指(zhi)(zhi)和(he)(he)食指(zhi)(zhi)捏住(zhu)另一(yi)(yi)邊(bian)(bian)末端，迅速(su)(su)繞培(pei)養皿(min)(min)口(kou)繞一(yi)(yi)圈，封口(kou)。
涂(tu)布接(jie)種
所用(yong)種(zhong)液必須經過(guo)弧菌檢測合格(ge)后方可(ke)使用(yong)。涂布棒在(zai)火焰(yan)上慢慢來回過(guo)火焰(yan)3次(ci)，冷卻（不(bu)(bu)可(ke)驟(zou)冷），將種(zhong)液用(yong)移液槍(qiang)(qiang)從試(shi)管(guan)吸出注入平板上面（槍(qiang)(qiang)管(guan)不(bu)(bu)可(ke)碰及試(shi)管(guan)外壁，更不(bu)(bu)能碰及其它物品或臺(tai)面），迅速用(yong)涂布棒在(zai)表面作(zuo)來回左右的涂布，讓藻(zao)液分(fen)布均勻，畢后，封口同平板劃線。
試管液體培養基接種
所用種液必須經過弧菌(jun)(jun)(jun)(jun)檢測合格后(hou)方(fang)可使用。火焰滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)前試管(guan)(guan)(guan)口(kou)外壁不能(neng)(neng)有水滴(di)（易(yi)導致(zhi)受(shou)熱不均而破裂）,燒試管(guan)(guan)(guan)口(kou)時(shi)(shi)，試管(guan)(guan)(guan)傾斜(xie)45度角，不斷移(yi)動(dong)試管(guan)(guan)(guan)，使試管(guan)(guan)(guan)口(kou)受(shou)熱均勻，滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)間3秒左(zuo)右。滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)后(hou)不能(neng)(neng)驟冷，防止試管(guan)(guan)(guan)破裂。畢后(hou)，用盛裝(zhuang)營養(yang)液150或200ml的錐形瓶(ping)（也要(yao)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)瓶(ping)口(kou)）向(xiang)試管(guan)(guan)(guan)中傾倒營養(yang)液，每次只能(neng)(neng)拿一個(ge)(ge)試管(guan)(guan)(guan)（注：若幾個(ge)(ge)試管(guan)(guan)(guan)對比時(shi)(shi)，可以同(tong)時(shi)(shi)拿在(zai)(zai)手(shou)里，用大(da)拇指和(he)手(shou)掌），倒好后(hou)，同(tong)樣試管(guan)(guan)(guan)和(he)錐形瓶(ping)口(kou)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，試管(guan)(guan)(guan)塞也要(yao)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，塞試管(guan)(guan)(guan)塞時(shi)(shi)不要(yao)移(yi)動(dong)試管(guan)(guan)(guan)迎接塞，以免(mian)試管(guan)(guan)(guan)在(zai)(zai)移(yi)動(dong)中納入可能(neng)(neng)含菌(jun)(jun)(jun)(jun)空氣，火焰旁(pang)為無菌(jun)(jun)(jun)(jun)。
所有試(shi)(shi)(shi)管(guan)分裝(zhuang)好(hao)后(hou)，即接種。用移(yi)(yi)液(ye)(ye)槍(qiang)選取移(yi)(yi)液(ye)(ye)量（試(shi)(shi)(shi)管(guan)口滅菌），注入新培(pei)養(yang)(yang)(yang)基，槍(qiang)管(guan)不(bu)可碰及管(guan)外壁，更不(bu)能碰及其它物品或(huo)臺面(mian)，一支槍(qiang)管(guan)只能和(he)同一種液(ye)(ye)使(shi)用，選取另一試(shi)(shi)(shi)管(guan)種液(ye)(ye)時必須更換槍(qiang)頭。接種畢后(hou)，選取合適(shi)光(guang)照(zhao)溫度培(pei)養(yang)(yang)(yang)。由(you)于試(shi)(shi)(shi)管(guan)培(pei)養(yang)(yang)(yang)是靜(jing)置培(pei)養(yang)(yang)(yang)，而在靜(jing)置條件下，藻細(xi)胞(bao)會(hui)聚集在試(shi)(shi)(shi)管(guan)底部，且藻細(xi)胞(bao)周(zhou)圍會(hui)形(xing)成透過養(yang)(yang)(yang)分的(de)屏障，營(ying)(ying)養(yang)(yang)(yang)鹽(yan)的(de)攝(she)入受阻，光(guang)照(zhao)吸(xi)收不(bu)均(jun)，為使(shi)營(ying)(ying)養(yang)(yang)(yang)鹽(yan)攝(she)入正常，藻細(xi)胞(bao)受光(guang)均(jun)勻，需要(yao)定(ding)時搖置試(shi)(shi)(shi)管(guan)（手(shou)先噴消毒酒(jiu)精，手(shou)腕(wan)使(shi)勁搖，不(bu)要(yao)擺(bai)臂(bei)，不(bu)能倒置搖）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三(san)角瓶(ping)接種需(xu)無菌(jun)操(cao)作(zuo)。500ml瓶(ping)，2.5L瓶(ping)液(ye)體培養基(ji)接種均(jun)在(zai)室內衛(wei)生條件下操(cao)作(zuo)。3種瓶(ping)和所需(xu)營養液(ye)及錫紙，移液(ye)管(guan)，洗耳球，氣管(guan)，氣石均(jun)需(xu)經消(xiao)毒清(qing)洗，滅菌(jun)后使用。三(san)角瓶(ping)需(xu)定時搖置，500ml，2.5L瓶(ping)培養在(zai)通氣條件下培養。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石均(jun)需經消毒清洗(xi)(xi)，滅菌(jun)后使(shi)用(yong)(yong)(yong)，抽藻管(guan)(guan)前次用(yong)(yong)(yong)畢(bi)后應(ying)(ying)當用(yong)(yong)(yong)水(shui)(shui)(shui)(shui)泵將管(guan)(guan)內灌滿消毒鹽(yan)酸溶液，今次用(yong)(yong)(yong)前需用(yong)(yong)(yong)海水(shui)(shui)(shui)(shui)或淡水(shui)(shui)(shui)(shui)沖(chong)洗(xi)(xi)干凈后使(shi)用(yong)(yong)(yong)。選取的(de)種液應(ying)(ying)當是無(wu)明顯沉淀，泡沫，原生(sheng)動物(wu)(wu)，附著(zhu)物(wu)(wu)，色澤正(zheng)常(chang)(chang)，藻細(xi)胞密度(du)大，形態正(zheng)常(chang)(chang)，弧菌(jun)檢(jian)測(ce)合格后選用(yong)(yong)(yong)。所用(yong)(yong)(yong)海水(shui)(shui)(shui)(shui)漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)(shui)(shui)消毒有效氯(lv)應(ying)(ying)足10ppm，曝氣(qi)(qi)12小時(shi)(shi)，檢(jian)測(ce)余氯(lv)，加硫代硫酸鈉中(zhong)和，方可使(shi)用(yong)(yong)(yong)。若使(shi)用(yong)(yong)(yong)稀(xi)釋的(de)漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)(shui)(shui)，應(ying)(ying)當天(tian)配制(zhi)當天(tian)使(shi)用(yong)(yong)(yong)，而(er)未使(shi)用(yong)(yong)(yong)的(de)要在24小時(shi)(shi)后棄去。且(qie)稀(xi)釋的(de)漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)(shui)(shui)必(bi)須加蓋放在避光的(de)容器內保存(cun)。由于漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)(shui)(shui)會隨時(shi)(shi)間漸漸分解，一次性購(gou)入的(de)漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)(shui)(shui)不應(ying)(ying)太多，不要過量儲存(cun)，以免影響滅菌(jun)功效。
1,2，3級接藻示意
試管→三角瓶→500ml瓶子→2500ml瓶子→20升(sheng)的藻(zao)種聚乙烯袋 →18升(sheng)的擴培藻(zao)聚乙烯袋或者(zhe)培藻(zao)池(chi)
相關說明
1、母(mu)液(ye)的(de)配(pei)置可以參考教科書上所寫，然(ran)后結合當地的(de)水質適(shi)當修改(gai)即(ji)可。氮，磷(lin)，鐵(tie)元(yuan)素(su)，維生素(su)B1,B12是(shi)必須使用,維生素(su)母(mu)液(ye)保存于低(di)溫(wen)弱光環境下，其(qi)中維生素(su)的(de)添加需(xu)要先(xian)(xian)高壓滅(mie)(mie)菌后再加入母(mu)液(ye)中。其(qi)余(yu)營養鹽先(xian)(xian)配(pei)置好后，再滅(mie)(mie)菌。如果是(shi)硅(gui)藻類(lei)，還(huan)應加上硅(gui)酸鈉。
2、保種室所需(xu)營(ying)養液(ye)（母液(ye)千分之(zhi)0.8的比例添加(jia)）除需(xu)高壓(ya)滅菌外(wai)還必須經(jing)過真空泵抽濾后才能用，微(wei)孔(kong)濾膜直徑(jing)為50毫米(mi)，孔(kong)徑(jing)為0.2微(wei)米(mi)。
3、接種比(bi)例A:試(shi)管0.07—0.09（隨密度大(da)小變化），10毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)試(shi)管加(jia)營(ying)養液(ye)(ye)(ye)7毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)，藻種0.5毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)，20毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)試(shi)管中營(ying)養液(ye)(ye)(ye)加(jia)12.5毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)營(ying)養液(ye)(ye)(ye)，1毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)藻種。B:三角瓶(ping)(ping)0.09-0.11。在100毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)，150毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)，200毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)，250毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)三角瓶(ping)(ping)中分別加(jia)營(ying)養液(ye)(ye)(ye)，70，80，120，150毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)（可(ke)按(an)一試(shi)管對應(ying)(ying)一個(ge)(ge)三角瓶(ping)(ping)加(jia)入），C: 500毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)瓶(ping)(ping)（400毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)營(ying)養液(ye)(ye)(ye)）(按(an)1個(ge)(ge)三角瓶(ping)(ping)對應(ying)(ying)1個(ge)(ge)500毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)瓶(ping)(ping)加(jia)入)D:2.5升(sheng)瓶(ping)(ping)（2升(sheng)營(ying)養液(ye)(ye)(ye)）（按(an)1個(ge)(ge)500毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)瓶(ping)(ping)對應(ying)(ying)1個(ge)(ge)2.5升(sheng)瓶(ping)(ping)加(jia)入），注意：上述若(ruo)發現(xian)藻生長情況不(bu)好(hao)，需要(yao)先鏡(jing)檢，判(pan)斷后(hou)再決(jue)定是否接種。
一般情況下3袋二(er)級(ji)藻種(zhong)應先(xian)擴(kuo)(kuo)培接種(zhong)于容量(liang)400升(sheng)的桶（海(hai)水貯備(bei)及營養液提前(qian)配置好），然(ran)后立即進行二(er)級(ji)藻袋擴(kuo)(kuo)種(zhong)，每(mei)個聚乙烯袋加18升(sheng)左右藻水。
4、保種培養基(ji)制備：按1.5%的比例加瓊脂(zhi)粉，煮沸后加營(ying)養鹽（母(mu)液千(qian)分(fen)之1添加），高壓滅菌。維(wei)生素需高壓滅菌后培養基(ji)冷卻(que)至30攝(she)氏度方(fang)可(ke)加入。（可(ke)用劃線法，涂(tu)布(bu)法等分(fen)離培養藻種）。
5、儀(yi)器(qi)(qi)的清(qing)洗維(wei)護。溶(rong)劑過濾(lv)器(qi)(qi)使用(yong)后(hou)只用(yong)洗潔(jie)精和清(qing)水(shui)清(qing)洗。高壓滅菌后(hou)備用(yong)。其它玻璃儀(yi)器(qi)(qi)，氣(qi)管，氣(qi)石，移液(ye)(ye)槍筒(tong)使用(yong)后(hou)需要浸泡(pao)在(zai)百(bai)分(fen)之(zhi)一(yi)到百(bai)分(fen)之(zhi)十的稀鹽(yan)酸溶(rong)液(ye)(ye)中至少半天，才能拿出(chu)清(qing)洗，風干，高壓滅菌后(hou)備用(yong)。
說(shuo)明：10的2次方標示(shi)成10^2，以下數(shu)字的次方通用此表示(shi)法(fa)
三級藻生產
三級藻(zao)系(xi)統(tong)包括用(yong)水處理以及配送，溫度與光照控制(zhi)，藻(zao)種的供應等。為確保擴(kuo)(kuo)大培(pei)(pei)養(yang)成功，從接種到收獲的培(pei)(pei)養(yang)時(shi)間(jian)應該盡量(liang)縮短，以避免因為開放式培(pei)(pei)養(yang)隨培(pei)(pei)養(yang)規模擴(kuo)(kuo)大接觸外界感染源時(shi)間(jian)加長，三級藻(zao)池滋生過多(duo)的有害生物(wu)，使三級培(pei)(pei)養(yang)失敗。
1—1高水位低(di)密(mi)(mi)度接種(zhong)（接種(zhong)密(mi)(mi)度為(wei)P×10^4cell/ml,P為(wei)接種(zhong)密(mi)(mi)度萬位數值）（未特別說明藻水藻細胞密(mi)(mi)度就(jiu)是cell/ml）（以下的推理(li)是建(jian)立(li)在三級(ji)藻第二次加水和收獲的密(mi)(mi)度為(wei)105級(ji)）
若(ruo)一(yi)天(tian)(tian)三級濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)(xu)求量(liang)為(wei)(wei)A升(sheng)，則(ze)總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目為(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為(wei)(wei)A升(sheng)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密度(du)(du)千萬位(wei)的數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)),一(yi)般(ban)情況下二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的密度(du)(du)為(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密度(du)(du)百萬位(wei)的數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)),若(ruo)第一(yi)天(tian)(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水，則(ze)一(yi)天(tian)(tian)需(xu)(xu)要二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升(sheng)，第三天(tian)(tian)加(jia)水F噸，此時(shi)加(jia)水后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水密度(du)(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)第三天(tian)(tian)加(jia)F噸水之前(qian)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水密度(du)(du)十萬位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)），然(ran)后第五天(tian)(tian)收獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目應(ying)為(wei)(wei)H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水密度(du)(du)十萬位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu),H為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目)，因為(wei)(wei)總(zong)需(xu)(xu)求量(liang)的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目應(ying)等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目，則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經(jing)過(guo)計算是A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若一(yi)天(tian)需濃(nong)(nong)縮藻320升(sheng)，則(ze)(ze)A=320，(一(yi)般情況下E和F的(de)值接(jie)近(jin)(jin))，則(ze)(ze)因為K=H,所以(yi)320×B=20EZ,即320B=20EZ，E=16B/Z,即B/Z噸(dun)藻池(chi)(chi)藻水(shui)可以(yi)收集(ji)濃(nong)(nong)縮藻20升(sheng)(B為濃(nong)(nong)縮藻密度(du)千萬位(wei)的(de)數值,Z為藻池(chi)(chi)藻水(shui)密度(du)十萬位(wei)數)，即若一(yi)天(tian)需要濃(nong)(nong)縮藻A升(sheng)，則(ze)(ze)每天(tian)應接(jie)種E=AB÷20Z噸(dun)水(shui)。（Z和B的(de)值應經(jing)過三級培(pei)養和收集(ji)藻水(shui)后(hou)才知道近(jin)(jin)似數值）。
1—2高水(shui)位低密度接種（接種密度為P×10^4cell/ml,P為接種密度萬(wan)位數(shu)值）（未特別(bie)說明的(de)藻(zao)水(shui)藻(zao)細胞密度就是cell/ml）（以下的(de)推理是建立在三級藻(zao)第(di)二(er)次加水(shui)和收獲密度為10^6級）。
若一(yi)天(tian)(tian)三級(ji)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求(qiu)量為(wei)A升(sheng)，則(ze)(ze)(ze)總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數目(mu)(mu)(mu)為(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)A升(sheng)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數值，B為(wei)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千(qian)萬(wan)位(wei)的(de)數值),一(yi)般(ban)情(qing)況下二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)密(mi)度(du)為(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百萬(wan)位(wei)的(de)數值),若一(yi)天(tian)(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)，則(ze)(ze)(ze)一(yi)天(tian)(tian)需(xu)要(yao)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升(sheng)，第(di)三天(tian)(tian)加(jia)水(shui)(shui)(shui)F噸，此時加(jia)水(shui)(shui)(shui)后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為(wei)第(di)三天(tian)(tian)加(jia)F噸水(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)位(wei)數值），然后(hou)(hou)第(di)五天(tian)(tian)收(shou)獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數目(mu)(mu)(mu)應(ying)為(wei)H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)位(wei)數,H為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數目(mu)(mu)(mu))，因為(wei)總(zong)需(xu)求(qiu)量的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數目(mu)(mu)(mu)應(ying)等于最后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數目(mu)(mu)(mu)，則(ze)(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze)(ze) A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經過計算(suan)是A×B=(E+F) ×100×Z, (一(yi)般(ban)情(qing)況下E和F的(de)值接近)，則(ze)(ze)(ze)近似(si)AB=200EZ, 即若一(yi)天(tian)(tian)需(xu)要(yao)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)，則(ze)(ze)(ze)每天(tian)(tian)應(ying)接種E=AB÷200Z噸水(shui)(shui)(shui)。（Z和B的(de)值應(ying)經過三級(ji)培養和收(shou)集(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)后(hou)(hou)才知道近似(si)數值）。
2—1低水位(wei)高密(mi)度(du)(du)接(jie)種（接(jie)種密(mi)度(du)(du)為P×10^5cell/ml,P為接(jie)種密(mi)度(du)(du)十萬位(wei)數值）（未特別說(shuo)明(ming)藻(zao)水藻(zao)細胞密(mi)度(du)(du)就是(shi)cell/ml）（以下的推理是(shi)建立在(zai)三(san)(san)級藻(zao)第二(er)次，第三(san)(san)次加(jia)水和收獲的密(mi)度(du)(du)為105級）。
若一天(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)三級(ji)濃(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求(qiu)量為(wei)A升，則總(zong)(zong)(zong)(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)目(mu)(mu)(mu)為(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)A升濃(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)值(zhi)，B為(wei)濃(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)(mi)度(du)千萬(wan)(wan)位的(de)數(shu)值(zhi)),一般情況(kuang)下(xia)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)密(mi)(mi)(mi)(mi)度(du)為(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)(mi)度(du)百(bai)萬(wan)(wan)位的(de)數(shu)值(zhi)),若第(di)一天(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)接種E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)，則一天(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)需(xu)要二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第(di)二(er)天(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)F噸(dun)，此時加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)(mi)度(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)第(di)二(er)天(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)F噸(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)之前(qian)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)(mi)度(du)十(shi)萬(wan)(wan)位數(shu)值(zhi)），然后第(di)三天(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)G噸(dun)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)密(mi)(mi)(mi)(mi)度(du)應(ying)為(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)(mi)度(du)十(shi)萬(wan)(wan)位數(shu))，第(di)四天(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)或第(di)五天(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)(zong)(zong)數(shu)目(mu)(mu)(mu)應(ying)為(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)(mi)度(du)十(shi)萬(wan)(wan)位數(shu),H為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)(zong)(zong)數(shu)目(mu)(mu)(mu))，因(yin)為(wei)總(zong)(zong)(zong)(zong)需(xu)求(qiu)量的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)目(mu)(mu)(mu)應(ying)等(deng)于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)(zong)(zong)數(shu)目(mu)(mu)(mu)。
則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經(jing)過計算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般情(qing)況下E,F,G的值接(jie)近(jin)(jin))，則(ze)(ze)近(jin)(jin)似(si)AB=30EW, 即若一天需要濃(nong)縮藻(zao)A升(sheng)，則(ze)(ze)每天應(ying)接(jie)種E=AB÷30W噸水。（W和B的值應(ying)經過三級(ji)培養和收集藻(zao)水后才(cai)知道(dao)近(jin)(jin)似(si)數值）。
2—2低水(shui)位高密度(du)(du)接種（接種密度(du)(du)為(wei)P×10^5cell/ml,P為(wei)接種密度(du)(du)十萬位數值）（未(wei)特別說明(ming)藻水(shui)藻細胞密度(du)(du)就是cell/ml）（以下的推理(li)是建立在三級藻第(di)二次，第(di)三次加水(shui)和收獲的密度(du)(du)為(wei)10^6級）。
若(ruo)一天(tian)三級(ji)(ji)濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求(qiu)量為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)，則(ze)(ze)總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)(shu)目(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度千萬(wan)位(wei)(wei)的(de)數(shu)(shu)值(zhi)),一般情況(kuang)(kuang)下二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)密(mi)(mi)度為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)的(de)數(shu)(shu)值(zhi)),若(ruo)一天(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)，則(ze)(ze)一天(tian)需(xu)要(yao)二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積(ji)d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升(sheng)，第(di)二(er)天(tian)加水(shui)(shui)(shui)(shui)F噸，此時(shi)加水(shui)(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)第(di)二(er)天(tian)加F噸水(shui)(shui)(shui)(shui)之前(qian)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)值(zhi)），然(ran)后第(di)三天(tian)加水(shui)(shui)(shui)(shui)G噸時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞密(mi)(mi)度應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu))，第(di)四天(tian)或第(di)五天(tian)收獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)(shu)目(mu)應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)(shu)目(mu))，因為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)總(zong)需(xu)求(qiu)量的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)(shu)目(mu)應(ying)等于(yu)最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)(shu)目(mu)，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經過計(ji)算是A×B=(E+F+G) ×10×W。(一般情況(kuang)(kuang)下E,F,G的(de)值(zhi)接近)，則(ze)(ze)近似(si)AB=300EW, 即若(ruo)一天(tian)需(xu)要(yao)濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)，則(ze)(ze)每天(tian)應(ying)接種E=AB÷300W噸水(shui)(shui)(shui)(shui)。（W和(he)B的(de)值(zhi)應(ying)經過實地三級(ji)(ji)培養(yang)和(he)收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)后才知道(dao)近似(si)數(shu)(shu)值(zhi)）。
