對蝦(xia)種苗企業的(de)(de)(de)(de)(de)(de)生存主要是(shi)依靠蝦(xia)苗養殖效果(guo)來決定的(de)(de)(de)(de)(de)(de)，蝦(xia)苗成(cheng)活率(lv)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)高低直接影(ying)響著(zhu)產業鏈的(de)(de)(de)(de)(de)(de)上(shang)上(shang)下(xia)下(xia)。單(dan)胞(bao)藻(zao)對于(yu)蝦(xia)苗早期是(shi)最適合的(de)(de)(de)(de)(de)(de)餌料，如(ru)(ru)果(guo)培育(yu)得當，不(bu)(bu)僅可(ke)以節約成(cheng)本，減少育(yu)苗水體(ti)環(huan)境負荷，尤其是(shi)對于(yu)蝦(xia)苗的(de)(de)(de)(de)(de)(de)發育(yu)打下(xia)堅實的(de)(de)(de)(de)(de)(de)基礎，提高成(cheng)活率(lv)。結合個人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)育(yu)苗感受，投(tou)(tou)(tou)(tou)喂(wei)單(dan)胞(bao)藻(zao)與不(bu)(bu)投(tou)(tou)(tou)(tou)喂(wei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)區(qu)別還(huan)是(shi)有的(de)(de)(de)(de)(de)(de)，比如(ru)(ru)苗的(de)(de)(de)(de)(de)(de)變態時間縮短，活力個頭(tou)大(da)小，水質均優于(yu)未投(tou)(tou)(tou)(tou)喂(wei)單(dan)胞(bao)藻(zao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)苗，當然如(ru)(ru)果(guo)培育(yu)不(bu)(bu)得當，反作用(yong)也有，比如(ru)(ru)投(tou)(tou)(tou)(tou)喂(wei)有害菌超(chao)標的(de)(de)(de)(de)(de)(de)藻(zao)液(ye)，藻(zao)類(lei)老化，投(tou)(tou)(tou)(tou)喂(wei)過量(liang)等。所以合理(li)運用(yong)，方(fang)(fang)可(ke)收到理(li)想效果(guo)。限于(yu)個人水平，描述方(fang)(fang)法的(de)(de)(de)(de)(de)(de)錯誤不(bu)(bu)足(zu)之處，懇(ken)請大(da)家(jia)指正。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超凈(jing)工作臺(tai)
使(shi)用前(qian)提(ti)前(qian)開機，打開紫外(wai)線燈和風機開關(guan)20分(fen)鐘(zhong)。超(chao)(chao)凈臺(tai)(tai)面(mian)上不(bu)存放不(bu)必要的(de)物品，保(bao)持(chi)工(gong)作(zuo)區(qu)內(nei)(nei)的(de)凈化氣流不(bu)受干擾(rao)，工(gong)作(zuo)時盡量(liang)避(bi)免作(zuo)明顯干擾(rao)氣流的(de)動作(zuo)；超(chao)(chao)凈臺(tai)(tai)保(bao)持(chi)光滑(hua)水(shui)平(ping)，光滑(hua)便(bian)于用酒精消(xiao)毒(du)布擦，水(shui)平(ping)是(shi)倒培(pei)養(yang)基時使(shi)培(pei)養(yang)皿內(nei)(nei)平(ping)板厚度一致。工(gong)作(zuo)時超(chao)(chao)凈臺(tai)(tai)周圍空(kong)(kong)氣流動要緩(huan)慢，雜菌(jun)盡量(liang)減少，所以要定期清潔消(xiao)毒(du)保(bao)種室內(nei)(nei)，關(guan)閉門窗(chuang)，盡可能減少雜菌(jun)數(shu)量(liang)；空(kong)(kong)氣過濾(lv)網(wang)定期清潔。
（2）真空泵和溶(rong)劑過濾(lv)器(qi)及(ji)過濾(lv)膜
此(ci)環節(jie)過濾只是為單(dan)胞(bao)藻純培養(yang)室（保(bao)種，提純，擴培試管級）準備(bei)清潔無(wu)菌海(hai)水。其他級別的培養(yang)無(wu)需此(ci)環節(jie)。
過(guo)濾(lv)(lv)(lv)膜使用0.2微(wei)米孔(kong)徑，不可用手拿，用鑷子選取。真空(kong)(kong)泵與溶劑過(guo)濾(lv)(lv)(lv)器之間通過(guo)合適(shi)口徑的(de)橡(xiang)膠管連接緊密，每次過(guo)濾(lv)(lv)(lv)要注(zhu)意濾(lv)(lv)(lv)膜的(de)過(guo)濾(lv)(lv)(lv)效果(guo)，防(fang)止濾(lv)(lv)(lv)孔(kong)阻塞影(ying)響(xiang)過(guo)濾(lv)(lv)(lv)效果(guo)。濾(lv)(lv)(lv)瓶內(nei)的(de)濾(lv)(lv)(lv)液(ye)不能沒過(guo)濾(lv)(lv)(lv)板出水口，否則濾(lv)(lv)(lv)液(ye)將被抽吸(xi)入真空(kong)(kong)泵，導致真空(kong)(kong)泵損(sun)壞。
應(ying)該(gai)使濾板內(nei)的(de)營(ying)養液過(guo)濾盡后（無水滴）才能停泵。要定期注(zhu)意(yi)真空泵內(nei)油量，注(zhu)意(yi)加油。
(3) 恒溫鼓風干燥箱
設(she)(she)定(ding)(ding)(ding)溫度時。先按控溫儀功(gong)能鍵SET進入(ru)溫度設(she)(she)定(ding)(ding)(ding)狀(zhuang)態，此時SP設(she)(she)定(ding)(ding)(ding)顯示一(yi)(yi)閃一(yi)(yi)閃，要按移動位(wei)(wei)鍵配合加(jia)鍵或減鍵，設(she)(she)定(ding)(ding)(ding)時先從分位(wei)(wei)數字(zi)設(she)(she)定(ding)(ding)(ding)，一(yi)(yi)直到百位(wei)(wei)數，設(she)(she)定(ding)(ding)(ding)結束(shu)需按一(yi)(yi)下(xia)功(gong)能鍵SET,此時干燥箱進入(ru)升溫狀(zhuang)態，加(jia)熱指(zhi)示燈(deng)(deng)亮，當箱內溫度接近(jin)設(she)(she)定(ding)(ding)(ding)溫度時，加(jia)熱指(zhi)示燈(deng)(deng)閃動多次，控制進入(ru)恒溫狀(zhuang)態。
使用注意事項(xiang)：物(wu)品不(bu)(bu)能(neng)(neng)(neng)堆得太滿，更不(bu)(bu)能(neng)(neng)(neng)堵住(zhu)出風(feng)口，以免影響溫度均勻上升。若是有牛皮紙(zhi)和(he)保鮮(xian)膜時，溫度不(bu)(bu)能(neng)(neng)(neng)超過180度。取(qu)出物(wu)品時，箱內外溫差不(bu)(bu)宜過高，防止玻(bo)璃(li)器皿炸裂(lie)。橡膠制品不(bu)(bu)能(neng)(neng)(neng)放入。
（4）加濕(shi)器
配合生(sheng)化培養箱使(shi)用。
水(shui)源是蒸餾水(shui)；不應容(rong)器(qi)內(nei)帶水(shui)移(yi)動加(jia)濕(shi)器(qi)；加(jia)水(shui)時應在容(rong)器(qi)上(shang)表示的滿水(shui)線(xian)為(wei)止。
應(ying)注意的(de)事項：平時留意觀察(cha)水(shui)箱(xiang)的(de)存水(shui)量，及時予以補充(chong)，遠離熱源(yuan)，腐蝕物。
（5）蒸汽消毒(du)器(qi)
容(rong)器加水(shui)時，水(shui)位(wei)(wei)一定(ding)要超(chao)過電熱(re)(re)管，最好是到(dao)3個支撐點的(de)(de)下(xia)緣，如果連續(xu)使用，應在每次消毒(du)前補(bu)足蒸發水(shui)量(liang)，不然少(shao)水(shui)會燒壞電熱(re)(re)管。蓋上(shang)的(de)(de)放氣軟(ruan)管插入(ru)消毒(du)桶圓(yuan)槽內，對正蓋和主體的(de)(de)螺栓槽，依次將(jiang)相對方的(de)(de)翼型螺母予以旋緊(jin)，使蓋與主體密合，加熱(re)(re)開始時，應將(jiang)放氣閥與安全閥的(de)(de)小(xiao)手柄扳至垂直放氣方位(wei)(wei)，必須待有較(jiao)急(ji)蒸汽(qi)噴出，即將(jiang)小(xiao)手柄扳回水(shui)平“關閉”方位(wei)(wei)。
當到達(da)所需壓力(li)和溫度，計算消毒時間，消毒畢后，關閉(bi)電源(yuan)，待壓力(li)指(zhi)針(zhen)指(zhi)向0時，將放(fang)氣(qi)閥的小手柄(bing)扳至垂(chui)直放(fang)氣(qi)方位，氣(qi)放(fang)完(wan)后，打開容器蓋(gai)。物品消毒后要(yao)迅速干(gan)燥。
應(ying)注意(yi)滅菌(jun)液(ye)體(ti)時(shi)，不超(chao)過(guo)盛液(ye)體(ti)容(rong)器(qi)體(ti)積的(de)3/4，瓶(ping)塞(sai)不可用軟(ruan)木塞(sai)或未打孔的(de)橡膠(jiao)塞(sai)。滅菌(jun)器(qi)內冷(leng)空(kong)(kong)氣(qi)(qi)必須完(wan)全排除。因為空(kong)(kong)氣(qi)(qi)的(de)膨(peng)脹(zhang)壓(ya)(ya)(ya)大于(yu)水蒸(zheng)氣(qi)(qi)的(de)膨(peng)脹(zhang)壓(ya)(ya)(ya)，當水蒸(zheng)氣(qi)(qi)含冷(leng)空(kong)(kong)氣(qi)(qi)時(shi)，壓(ya)(ya)(ya)力(li)(li)表所(suo)表示的(de)壓(ya)(ya)(ya)力(li)(li)是水蒸(zheng)氣(qi)(qi)壓(ya)(ya)(ya)力(li)(li)和(he)部分冷(leng)空(kong)(kong)氣(qi)(qi)壓(ya)(ya)(ya)力(li)(li)之和(he)，不是水蒸(zheng)氣(qi)(qi)的(de)實際壓(ya)(ya)(ya)力(li)(li)，而同一壓(ya)(ya)(ya)力(li)(li)下的(de)實際溫(wen)度，含空(kong)(kong)氣(qi)(qi)的(de)蒸(zheng)汽(qi)低于(yu)飽(bao)和(he)蒸(zheng)汽(qi)，這樣導致達不了消(xiao)毒效(xiao)果。絕不可堵塞(sai)安全閥出氣(qi)(qi)孔，必須留空(kong)(kong)位保(bao)證其暢通放氣(qi)(qi)，發現超(chao)溫(wen)超(chao)壓(ya)(ya)(ya)，立即斷電(dian)。
蒸餾器
先(xian)關閉放水(shui)(shui)(shui)閥，打開進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，待溢水(shui)(shui)(shui)皮(pi)(pi)管有水(shui)(shui)(shui)流出(chu)，方(fang)可(ke)接通電源(yuan)，此時可(ke)暫時關閉進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，待出(chu)水(shui)(shui)(shui)皮(pi)(pi)管有蒸(zheng)餾水(shui)(shui)(shui)流出(chu)，打開進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，制(zhi)備蒸(zheng)餾水(shui)(shui)(shui)。定(ding)期清洗蒸(zheng)餾器內壁，除去水(shui)(shui)(shui)垢，不(bu)然影響蒸(zheng)餾水(shui)(shui)(shui)質量和使用效果。切(qie)不(bu)可(ke)關閉水(shui)(shui)(shui)閥制(zhi)備蒸(zheng)餾水(shui)(shui)(shui)，否則燒壞電熱管。
（6）鼓風機
定期更(geng)換吸氣口的過濾棉，異常情況，請電工檢查。
（7）空調(diao)
保種室若有生長藻(zao)種，需維持(chi)恒定溫(wen)(wen)度(du)，反之關閉。一級(ji)，二級(ji)空調視外界氣溫(wen)(wen)調整開關。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾水筒(tong)式(shi)過濾器。筒(tong)式(shi)過濾器的濾芯應用(yong)一(yi)次更換一(yi)次，用(yong)過的濾芯浸泡(pao)在1%鹽酸溶(rong)液中消毒(du)12h以上。然后用(yong)洗(xi)潔(jie)精清(qing)洗(xi)，再(zai)用(yong)足量(liang)清(qing)水沖(chong)洗(xi)干(gan)凈，晾(liang)干(gan)備用(yong)。（濾芯規格應小于(yu)等于(yu)0.5微米）。
2、試(shi)管(guan)(guan)(guan)（規格(ge)10毫升到(dao)20毫升），錐形(xing)瓶(ping)（50毫升到(dao)200毫升），500ml錐形(xing)瓶(ping)，2.5L瓶(ping)廣口瓶(ping)，移液管(guan)(guan)(guan)，移液槍(qiang)管(guan)(guan)(guan)/盒，玻璃氣(qi)管(guan)(guan)(guan)，膠氣(qi)管(guan)(guan)(guan)，氣(qi)石(shi)，溶劑過(guo)濾(lv)器，培養皿。用(yong)過(guo)后(hou)應當用(yong)清(qing)水清(qing)洗(xi)(xi)后(hou)浸泡于1% 鹽酸12h以上(shang)（溶劑過(guo)濾(lv)器除外(wai)，浸泡時相近大小器皿分類放不同的(de)消毒桶，規格(ge)相差大，易(yi)導致相互碰撞碎爛）然(ran)后(hou)用(yong)洗(xi)(xi)潔精清(qing)洗(xi)(xi)(用(yong)毛(mao)刷清(qing)洗(xi)(xi)試(shi)管(guan)(guan)(guan)底(di)(di)部時，不可太用(yong)力，否則底(di)(di)部易(yi)破裂)，再用(yong)大量(liang)清(qing)水沖(chong)洗(xi)(xi)干凈，風干或曬干，高壓(ya)滅菌后(hou)，放入恒溫干燥箱（膠氣(qi)管(guan)(guan)(guan)，氣(qi)石(shi)除外(wai)）干燥備用(yong)。
3、聚(ju)乙烯藻(zao)(zao)袋用(yong)(yong)(yong)于(yu)二級藻(zao)(zao)類藻(zao)(zao)種掛袋培養或(huo)(huo)3級擴培（一般使用(yong)(yong)(yong)盛裝藻(zao)(zao)液12升(sheng)左右）。先用(yong)(yong)(yong)清水沖洗(xi)干(gan)凈(jing)內外，浸泡于(yu)1% 鹽酸12h以上，再(zai)用(yong)(yong)(yong)大量清水沖洗(xi)干(gan)凈(jing)，風干(gan)或(huo)(huo)曬(shai)干(gan)，備用(yong)(yong)(yong)。由于(yu)藻(zao)(zao)袋近似密(mi)封性(xing)，對于(yu)防止微生物(wu)污(wu)染(ran)有(you)很(hen)好的效果。
4、毛巾(jin)、保種室，一級(ji)和二(er)級(ji)毛巾(jin)不可混用，所用毛巾(jin)后(hou)都(dou)應消毒清洗晾干后(hou)備用。
5、錫箔紙：除非粘上(shang)油污(wu)或污(wu)物以及破損，都應重復使用。
6、牛皮(pi)紙：定期拿(na)到烘箱(xiang)烘干。
7、定期(qi)更換空氣過(guo)濾器（用(yong)于1，2級培養的(de)進(jin)氣過(guo)濾）的(de)濾芯(xin)，濾芯(xin)已(yi)油化(hua)或沖散(san)的(de)棄去。
8、定期更換鼓風(feng)機進風(feng)口的過濾棉。
9、對新購(gou)入(ru)的器皿應先除去包裝(zhuang)沾染的污垢后，用(yong)(yong)洗潔精刷洗，流(liu)水沖凈，再浸泡(pao)于1%的鹽酸(suan)12h，使游(you)離的堿(jian)性物質(zhi)除去，再用(yong)(yong)清(qing)水沖洗干(gan)(gan)凈，風(feng)干(gan)(gan)或曬干(gan)(gan)備用(yong)(yong)。
室內衛生消毒
1、保種(zhong)(zhong)室(shi)每天早上用清水擦洗(xi)實驗臺面(mian)，地板，墻壁，木架后，開(kai)紫外(wai)燈(deng)消毒20分鐘(zhong)，此時關(guan)掉空調，關(guan)掉日(ri)光燈(deng)，由于紫外(wai)燈(deng)照射會(hui)產生(sheng)一定量的臭(chou)氧，對(dui)人體有害，所(suo)以消毒關(guan)閉紫外(wai)燈(deng)后人應隔一段時間再進(jin)去。進(jin)保種(zhong)(zhong)室(shi)換鞋。
2、一級和二(er)級室每天清潔，接(jie)(jie)種(zhong)前接(jie)(jie)種(zhong)后承載物框架(jia)都應用消毒液消毒。
3、門口消毒池定期更換消毒藥水（高(gao)錳(meng)酸(suan)鉀）。
4、常用消毒劑濃度 1%鹽酸，次氯(lv)酸鈉20ppm（有效氯(lv)），碘(dian)液（1000ppm）,酒精70-75%,高錳酸鉀1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所需(xu)燒杯，玻棒須清洗干凈(jing)，錐形瓶和培(pei)(pei)養皿(min)須消毒清洗滅(mie)(mie)菌烘干。將(jiang)稱(cheng)好的(de)純化(hua)瓊脂(zhi)粉加入燒杯再加入一定(ding)量的(de)海水(shui)，加熱（必須不停攪拌，以免瓊脂(zhi)糊底燒焦）至完全融化(hua)，加熱后的(de)瓊脂(zhi)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)應當透明(ming)無顯著沉淀，若(ruo)明(ming)顯，可采(cai)用清潔的(de)白色薄(bo)絨布或中間夾(jia)有薄(bo)層(ceng)吸水(shui)棉的(de)雙層(ceng)紗(sha)布鋪(pu)在(zai)漏(lou)斗(dou)上趁熱過濾，融化(hua)畢后精確(que)加入營養鹽（維生素B溶液須等培(pei)(pei)養基(ji)(ji)高壓滅(mie)(mie)菌后冷卻至50攝氏(shi)度(du)以下(xia)再加）。
培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)采(cai)用121攝(she)氏度高壓(ya)蒸汽滅(mie)菌20至(zhi)30分(fen)(fen)鐘即(ji)(ji)可，培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)滅(mie)菌后應立即(ji)(ji)取出(chu)，冷(leng)卻至(zhi)50攝(she)氏度以(yi)下，即(ji)(ji)加維生素B溶液。將(jiang)盛裝培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)錐形瓶(ping)和培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)放(fang)(fang)在超凈工作(zuo)臺上(shang)，點燃酒(jiu)精燈，右(you)手托起錐形瓶(ping)底(di)(di)，將(jiang)瓶(ping)口(kou)在酒(jiu)精燈稍(shao)加燒，然后迅速將(jiang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)倒入培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)中(zhong)，以(yi)鋪滿皿(min)(min)底(di)(di)為止（厚薄(bo)適中(zhong)）。鋪放(fang)(fang)好后，放(fang)(fang)置20-30分(fen)(fen)鐘，待培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)凝固后，即(ji)(ji)開始操作(zuo)。
若是做斜(xie)面(mian)培養(yang)基(ji)(ji)，則加入(ru)維生素B溶液(ye)后，將盛裝(zhuang)培養(yang)基(ji)(ji)的錐形(xing)瓶和試管以及一根厚約1厘米的小(xiao)木(mu)板放在超(chao)凈(jing)工(gong)作(zuo)臺(tai)上。分裝(zhuang)約為試管高度(du)的1/3-2/3（視情況操作(zuo)），分裝(zhuang)量應(ying)以能形(xing)成2/3底層(ceng)和1/3斜(xie)面(mian)量為好，擺置成適當斜(xie)面(mian)，待其(qi)自然凝固。培養(yang)基(ji)(ji)制(zhi)備(bei)好后，如發現(xian)破裂，水(shui)分浸入(ru)，色澤異常等均應(ying)棄去(qu).
待凝固后即進行操(cao)作(zuo)，現一般采用平(ping)板劃線(xian)接(jie)(jie)種(zhong)和涂布接(jie)(jie)種(zhong)。
平板劃線接種
接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)在(zai)酒(jiu)精(jing)燈火焰(yan)(yan)(yan)上充分燒紅后，接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)柄(bing)一邊(bian)(bian)轉動(dong)一邊(bian)(bian)慢(man)慢(man)來回通(tong)過(guo)火焰(yan)(yan)(yan)3次，待冷卻(que)至(zhi)室溫(wen)方(fang)可挑取藻(zao)種(zhong)(zhong)（為(wei)保(bao)證藻(zao)種(zhong)(zhong)不(bu)被燙死(si)，挑種(zhong)(zhong)前(qian)可將接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)觸培(pei)(pei)養(yang)皿內(nei)(nei)壁或培(pei)(pei)養(yang)基），迅速接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)至(zhi)新培(pei)(pei)養(yang)基（劃線(xian)(xian)可采用(yong)(yong)斜線(xian)(xian)法(fa)(fa)，方(fang)格法(fa)(fa)，曲線(xian)(xian)法(fa)(fa)，放(fang)射法(fa)(fa)等）。左手握(wo)住平板，用(yong)(yong)大(da)拇指和食指稍稍抬起皿蓋，同(tong)時靠近火焰(yan)(yan)(yan)周圍，右(you)手持接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)伸入皿內(nei)(nei)，在(zai)平板上一個區域作(zuo)(zuo)劃線(xian)(xian)（依方(fang)法(fa)(fa)不(bu)同(tong)，動(dong)作(zuo)(zuo)不(bu)同(tong)）。劃線(xian)(xian)時使(shi)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)與平板表面成(cheng)30-40度角(jiao)輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)觸，以(yi)腕力在(zai)表面作(zuo)(zuo)較(jiao)快的(de)滑動(dong)（注(zhu)意不(bu)要劃破(po)平板表面或伸進培(pei)(pei)養(yang)基內(nei)(nei)）。接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)挑種(zhong)(zhong)后和劃線(xian)(xian)完抽出時均不(bu)可碰及皿壁/口，更不(bu)能碰其(qi)它(ta)物體(ti)(ti)和臺面。接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)完后，將接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)從柄(bing)部(bu)至(zhi)環(huan)端(duan)逐漸(jian)通(tong)過(guo)酒(jiu)精(jing)燈火焰(yan)(yan)(yan)滅菌，不(bu)能直接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)燒環(huan)，以(yi)免殘留在(zai)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)上的(de)藻(zao)體(ti)(ti)或菌體(ti)(ti)爆濺污染(ran)空間(jian)。上述操作(zuo)(zuo)完成(cheng)后，即用(yong)(yong)無菌封口膜(mo)封培(pei)(pei)養(yang)皿口（膜(mo)使(shi)用(yong)(yong)前(qian)須(xu)用(yong)(yong)酒(jiu)精(jing)消毒，紫(zi)外燈消毒，風(feng)干(gan)），封口時，用(yong)(yong)左手大(da)拇指摁住膜(mo)一邊(bian)(bian)末(mo)端(duan)，右(you)手大(da)拇指和食指捏住另一邊(bian)(bian)末(mo)端(duan)，迅速繞培(pei)(pei)養(yang)皿口繞一圈，封口。
涂(tu)布接種
所用種液(ye)必須(xu)經過弧菌檢測合格后方可(ke)(ke)使用。涂(tu)布(bu)棒在火焰上(shang)慢慢來(lai)(lai)回過火焰3次，冷卻（不(bu)可(ke)(ke)驟冷），將種液(ye)用移液(ye)槍從試(shi)管(guan)吸出注入平(ping)板上(shang)面（槍管(guan)不(bu)可(ke)(ke)碰(peng)及試(shi)管(guan)外壁，更不(bu)能碰(peng)及其它物品或臺面），迅(xun)速(su)用涂(tu)布(bu)棒在表面作來(lai)(lai)回左右的涂(tu)布(bu)，讓藻液(ye)分布(bu)均(jun)勻，畢(bi)后，封口同平(ping)板劃線。
試管液體培養基接種
所(suo)用(yong)種(zhong)液(ye)必(bi)須經過(guo)弧菌(jun)(jun)(jun)(jun)檢測合格后方可(ke)使(shi)(shi)用(yong)。火焰滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)前試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)口外壁不(bu)能(neng)有水滴（易導致受(shou)熱不(bu)均(jun)而破裂）,燒試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)口時，試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)傾斜45度(du)角，不(bu)斷移(yi)(yi)動試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)，使(shi)(shi)試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)口受(shou)熱均(jun)勻，滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)時間3秒(miao)左右。滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)后不(bu)能(neng)驟冷，防止(zhi)試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)破裂。畢后，用(yong)盛裝營養液(ye)150或200ml的(de)錐形瓶(ping)（也要滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)瓶(ping)口）向試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)中傾倒營養液(ye)，每次(ci)只能(neng)拿一個(ge)試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)（注：若幾(ji)個(ge)試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)對比時，可(ke)以(yi)(yi)同(tong)時拿在(zai)手(shou)(shou)里，用(yong)大拇指和手(shou)(shou)掌），倒好后，同(tong)樣試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)和錐形瓶(ping)口滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)塞(sai)也要滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，塞(sai)試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)塞(sai)時不(bu)要移(yi)(yi)動試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)迎接塞(sai)，以(yi)(yi)免試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)(guan)在(zai)移(yi)(yi)動中納(na)入可(ke)能(neng)含菌(jun)(jun)(jun)(jun)空氣，火焰旁為無菌(jun)(jun)(jun)(jun)。
所(suo)有試(shi)管(guan)分裝(zhuang)好后(hou)，即接(jie)種。用(yong)移(yi)液槍選取移(yi)液量(liang)（試(shi)管(guan)口(kou)滅菌(jun)），注入新(xin)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基，槍管(guan)不(bu)(bu)(bu)可(ke)碰及管(guan)外壁，更(geng)不(bu)(bu)(bu)能(neng)碰及其它物品或(huo)臺面，一支槍管(guan)只(zhi)能(neng)和同一種液使用(yong)，選取另一試(shi)管(guan)種液時必須更(geng)換槍頭。接(jie)種畢后(hou)，選取合適(shi)光照(zhao)溫(wen)度培(pei)(pei)(pei)養(yang)。由于(yu)試(shi)管(guan)培(pei)(pei)(pei)養(yang)是靜置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)，而在(zai)靜置(zhi)條件(jian)下，藻(zao)細胞(bao)(bao)會(hui)聚集在(zai)試(shi)管(guan)底部，且(qie)藻(zao)細胞(bao)(bao)周圍會(hui)形(xing)成透過養(yang)分的屏障，營養(yang)鹽的攝(she)入受阻，光照(zhao)吸收不(bu)(bu)(bu)均，為(wei)使營養(yang)鹽攝(she)入正常，藻(zao)細胞(bao)(bao)受光均勻，需要定(ding)時搖(yao)(yao)置(zhi)試(shi)管(guan)（手先噴消毒酒(jiu)精(jing)，手腕使勁搖(yao)(yao)，不(bu)(bu)(bu)要擺臂，不(bu)(bu)(bu)能(neng)倒置(zhi)搖(yao)(yao)）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三(san)角(jiao)瓶(ping)(ping)接種需(xu)無菌操(cao)(cao)作。500ml瓶(ping)(ping)，2.5L瓶(ping)(ping)液體培養(yang)(yang)基接種均在室內(nei)衛生條(tiao)件(jian)下(xia)操(cao)(cao)作。3種瓶(ping)(ping)和所需(xu)營養(yang)(yang)液及(ji)錫紙，移液管(guan)，洗(xi)耳球，氣(qi)管(guan)，氣(qi)石均需(xu)經消毒清洗(xi)，滅菌后使(shi)用(yong)。三(san)角(jiao)瓶(ping)(ping)需(xu)定時(shi)搖(yao)置，500ml，2.5L瓶(ping)(ping)培養(yang)(yang)在通氣(qi)條(tiao)件(jian)下(xia)培養(yang)(yang)。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣管(guan)，氣石(shi)均需經消(xiao)毒(du)清洗(xi)(xi)，滅(mie)菌后(hou)使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)，抽(chou)藻管(guan)前(qian)次(ci)用(yong)(yong)畢后(hou)應(ying)當(dang)用(yong)(yong)水(shui)泵將管(guan)內灌(guan)滿(man)消(xiao)毒(du)鹽酸(suan)溶液(ye)，今次(ci)用(yong)(yong)前(qian)需用(yong)(yong)海水(shui)或淡水(shui)沖洗(xi)(xi)干(gan)凈(jing)后(hou)使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)。選取的(de)種液(ye)應(ying)當(dang)是無明顯沉淀，泡(pao)沫，原生動物，附著物，色(se)澤正(zheng)常，藻細胞密(mi)度(du)大，形態正(zheng)常，弧菌檢(jian)測(ce)(ce)合格后(hou)選用(yong)(yong)。所用(yong)(yong)海水(shui)漂白(bai)(bai)水(shui)消(xiao)毒(du)有效氯應(ying)足10ppm，曝氣12小(xiao)時，檢(jian)測(ce)(ce)余氯，加硫代硫酸(suan)鈉中和(he)，方可使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)。若使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)稀(xi)釋的(de)漂白(bai)(bai)水(shui)，應(ying)當(dang)天配制當(dang)天使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)，而未使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)的(de)要在24小(xiao)時后(hou)棄去。且稀(xi)釋的(de)漂白(bai)(bai)水(shui)必須加蓋放在避(bi)光的(de)容器內保存(cun)。由(you)于漂白(bai)(bai)水(shui)會隨時間漸漸分解(jie)，一(yi)次(ci)性購入的(de)漂白(bai)(bai)水(shui)不(bu)應(ying)太多，不(bu)要過量儲存(cun)，以免影響(xiang)滅(mie)菌功效。
1,2，3級接藻示意
試管→三角瓶(ping)→500ml瓶(ping)子(zi)→2500ml瓶(ping)子(zi)→20升(sheng)的藻(zao)種(zhong)聚乙烯袋(dai) →18升(sheng)的擴(kuo)培藻(zao)聚乙烯袋(dai)或者培藻(zao)池
相關說明
1、母(mu)液的配置可(ke)以參考教(jiao)科(ke)書上(shang)所寫，然后結(jie)合(he)當地(di)的水(shui)質適(shi)當修(xiu)改(gai)即可(ke)。氮(dan)，磷(lin)，鐵元素(su)(su)，維(wei)(wei)生素(su)(su)B1,B12是必(bi)須使用,維(wei)(wei)生素(su)(su)母(mu)液保存于(yu)低(di)溫弱光環境下，其中維(wei)(wei)生素(su)(su)的添加需要(yao)先高壓滅(mie)菌后再(zai)加入母(mu)液中。其余營養鹽(yan)先配置好后，再(zai)滅(mie)菌。如果是硅藻類(lei)，還應加上(shang)硅酸鈉(na)。
2、保種室所(suo)需(xu)營養液（母液千分之0.8的(de)比例添加）除需(xu)高壓滅(mie)菌外(wai)還必須經過真空泵(beng)抽濾(lv)后才能(neng)用，微(wei)孔濾(lv)膜直徑為50毫米(mi)，孔徑為0.2微(wei)米(mi)。
3、接種(zhong)比例A:試(shi)管0.07—0.09（隨密度(du)大小變化），10毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)試(shi)管加(jia)(jia)(jia)營(ying)養(yang)液(ye)(ye)7毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，藻(zao)(zao)種(zhong)0.5毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，20毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)試(shi)管中營(ying)養(yang)液(ye)(ye)加(jia)(jia)(jia)12.5毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)營(ying)養(yang)液(ye)(ye)，1毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)藻(zao)(zao)種(zhong)。B:三角(jiao)瓶0.09-0.11。在100毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，150毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，200毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，250毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)三角(jiao)瓶中分別加(jia)(jia)(jia)營(ying)養(yang)液(ye)(ye)，70，80，120，150毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)（可按(an)一試(shi)管對應一個(ge)(ge)三角(jiao)瓶加(jia)(jia)(jia)入），C: 500毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)瓶（400毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)營(ying)養(yang)液(ye)(ye)）(按(an)1個(ge)(ge)三角(jiao)瓶對應1個(ge)(ge)500毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)瓶加(jia)(jia)(jia)入)D:2.5升(sheng)(sheng)瓶（2升(sheng)(sheng)營(ying)養(yang)液(ye)(ye)）（按(an)1個(ge)(ge)500毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)瓶對應1個(ge)(ge)2.5升(sheng)(sheng)瓶加(jia)(jia)(jia)入），注意(yi)：上述若發現藻(zao)(zao)生長情況不好(hao)，需要先鏡檢，判斷后再決定是否接種(zhong)。
一般情況下3袋(dai)二(er)級藻(zao)種應(ying)先(xian)擴培(pei)接種于(yu)容(rong)量400升的桶（海(hai)水(shui)貯備及營(ying)養液提前配置(zhi)好），然后立即進行二(er)級藻(zao)袋(dai)擴種，每個聚(ju)乙烯袋(dai)加(jia)18升左右藻(zao)水(shui)。
4、保種(zhong)培(pei)(pei)養(yang)基制備：按1.5%的比例加瓊脂粉，煮沸后加營養(yang)鹽（母(mu)液千分之1添加），高壓滅(mie)菌(jun)。維生素需高壓滅(mie)菌(jun)后培(pei)(pei)養(yang)基冷卻(que)至30攝(she)氏度(du)方可加入。（可用劃線法，涂(tu)布法等分離培(pei)(pei)養(yang)藻種(zhong)）。
5、儀(yi)器的清(qing)洗(xi)維護。溶(rong)劑(ji)過濾(lv)器使(shi)用(yong)后只用(yong)洗(xi)潔精和清(qing)水清(qing)洗(xi)。高壓滅(mie)菌后備用(yong)。其它玻璃儀(yi)器，氣(qi)管，氣(qi)石(shi)，移(yi)液槍筒使(shi)用(yong)后需要浸(jin)泡在百(bai)分之一到(dao)百(bai)分之十的稀鹽酸溶(rong)液中至(zhi)少(shao)半天，才能拿(na)出(chu)清(qing)洗(xi)，風干，高壓滅(mie)菌后備用(yong)。
說明：10的2次方標示成10^2，以下數字的次方通用此(ci)表(biao)示法
三級藻生產
三(san)級藻系統包括(kuo)用水處理(li)以(yi)及配送，溫度與光照控制(zhi)，藻種的(de)(de)供應等。為確保(bao)擴大培(pei)養成(cheng)功，從接(jie)種到收獲的(de)(de)培(pei)養時(shi)(shi)間(jian)應該盡量縮(suo)短，以(yi)避免因(yin)為開放式培(pei)養隨培(pei)養規模擴大接(jie)觸外界(jie)感染源時(shi)(shi)間(jian)加長，三(san)級藻池滋生過多的(de)(de)有害生物，使三(san)級培(pei)養失敗。
1—1高水(shui)位(wei)低密(mi)度接種（接種密(mi)度為P×10^4cell/ml,P為接種密(mi)度萬位(wei)數值）（未特(te)別說(shuo)明藻水(shui)藻細胞密(mi)度就是cell/ml）（以(yi)下的(de)推(tui)理是建立在三級(ji)藻第(di)二(er)次加水(shui)和收獲的(de)密(mi)度為105級(ji)）
若一(yi)天(tian)三級(ji)(ji)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求量為(wei)A升，則總(zong)(zong)(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)目(mu)為(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為(wei)A升濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千萬(wan)位的(de)(de)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)),一(yi)般情況下(xia)二級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)(de)密(mi)度(du)為(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)二級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百萬(wan)位的(de)(de)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)),若第(di)一(yi)天(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)，則一(yi)天(tian)需要二級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升，第(di)三天(tian)加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)F噸，此(ci)時加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)第(di)三天(tian)加(jia)F噸水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)十萬(wan)位數(shu)(shu)(shu)值(zhi)），然后第(di)五天(tian)收(shou)獲(huo)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目(mu)應為(wei)H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)十萬(wan)位數(shu)(shu)(shu),H為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目(mu))，因為(wei)總(zong)(zong)(zong)需求量的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)目(mu)應等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目(mu)，則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經過(guo)計算是(shi)A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若一(yi)天需濃(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)320升(sheng)，則(ze)A=320，(一(yi)般情況下E和(he)F的(de)(de)值(zhi)接近(jin))，則(ze)因為(wei)(wei)K=H,所(suo)以(yi)320×B=20EZ,即320B=20EZ，E=16B/Z,即B/Z噸藻(zao)池藻(zao)水(shui)可以(yi)收集(ji)濃(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)20升(sheng)(B為(wei)(wei)濃(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)密度千萬位(wei)的(de)(de)數值(zhi),Z為(wei)(wei)藻(zao)池藻(zao)水(shui)密度十萬位(wei)數)，即若一(yi)天需要濃(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)A升(sheng)，則(ze)每天應接種E=AB÷20Z噸水(shui)。（Z和(he)B的(de)(de)值(zhi)應經過三級(ji)培養(yang)和(he)收集(ji)藻(zao)水(shui)后才知道近(jin)似數值(zhi)）。
1—2高水(shui)位(wei)低密度(du)接(jie)種（接(jie)種密度(du)為P×10^4cell/ml,P為接(jie)種密度(du)萬位(wei)數(shu)值）（未特別說(shuo)明的藻水(shui)藻細胞(bao)密度(du)就是cell/ml）（以下的推理是建立在三級藻第二次加水(shui)和(he)收獲密度(du)為10^6級）。
若一(yi)天(tian)(tian)(tian)(tian)三(san)(san)級(ji)(ji)濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量(liang)為(wei)(wei)A升(sheng)，則總藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數目(mu)為(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)A升(sheng)濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)所(suo)含的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數值(zhi)，B為(wei)(wei)濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)密度(du)(du)(du)千萬(wan)位(wei)(wei)的(de)(de)(de)數值(zhi)),一(yi)般情(qing)況下二級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)(de)(de)密度(du)(du)(du)為(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)二級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)密度(du)(du)(du)百萬(wan)位(wei)(wei)的(de)(de)(de)數值(zhi)),若一(yi)天(tian)(tian)(tian)(tian)接(jie)種E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)，則一(yi)天(tian)(tian)(tian)(tian)需要二級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升(sheng)，第三(san)(san)天(tian)(tian)(tian)(tian)加(jia)水(shui)F噸(dun)，此時(shi)加(jia)水(shui)后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密度(du)(du)(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為(wei)(wei)第三(san)(san)天(tian)(tian)(tian)(tian)加(jia)F噸(dun)水(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密度(du)(du)(du)百萬(wan)位(wei)(wei)數值(zhi)），然(ran)后(hou)(hou)第五天(tian)(tian)(tian)(tian)收(shou)獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總數目(mu)應(ying)為(wei)(wei)H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密度(du)(du)(du)百萬(wan)位(wei)(wei)數,H為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總數目(mu))，因為(wei)(wei)總需求(qiu)量(liang)的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數目(mu)應(ying)等于最后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總數目(mu)，則K=H,則 A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經(jing)過計(ji)算是A×B=(E+F) ×100×Z, (一(yi)般情(qing)況下E和(he)F的(de)(de)(de)值(zhi)接(jie)近)，則近似(si)(si)AB=200EZ, 即若一(yi)天(tian)(tian)(tian)(tian)需要濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)，則每天(tian)(tian)(tian)(tian)應(ying)接(jie)種E=AB÷200Z噸(dun)水(shui)。（Z和(he)B的(de)(de)(de)值(zhi)應(ying)經(jing)過三(san)(san)級(ji)(ji)培養和(he)收(shou)集藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)后(hou)(hou)才知(zhi)道近似(si)(si)數值(zhi)）。
2—1低(di)水位(wei)高密度(du)接種（接種密度(du)為P×10^5cell/ml,P為接種密度(du)十萬位(wei)數值）（未(wei)特別(bie)說(shuo)明藻水藻細胞密度(du)就是(shi)cell/ml）（以下的推理是(shi)建立在三級(ji)藻第二次，第三次加水和(he)收獲的密度(du)為105級(ji)）。
若(ruo)一(yi)(yi)天(tian)三級濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求量(liang)為A升，則總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)目(mu)為K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為A升濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所(suo)含的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)，B為濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)千萬位(wei)的(de)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)),一(yi)(yi)般情況下二(er)(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)為C×10^6cell/ml(C為二(er)(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)百(bai)萬位(wei)的(de)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)),若(ruo)第一(yi)(yi)天(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)，則一(yi)(yi)天(tian)需要二(er)(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第二(er)(er)(er)天(tian)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)F噸，此時加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為第二(er)(er)(er)天(tian)加(jia)(jia)F噸水(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)十萬位(wei)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)），然后第三天(tian)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)G噸時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)(bao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)應(ying)為J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)十萬位(wei)數(shu)(shu)(shu))，第四天(tian)或(huo)第五天(tian)收獲(huo)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)目(mu)應(ying)為H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)十萬位(wei)數(shu)(shu)(shu),H為藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)目(mu))，因(yin)為總(zong)需求量(liang)的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)目(mu)應(ying)等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)目(mu)。
則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經過計算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般情況下E,F,G的值接近)，則近似AB=30EW, 即若一天(tian)需(xu)要濃縮藻(zao)A升，則每天(tian)應(ying)接種E=AB÷30W噸(dun)水。（W和(he)(he)B的值應(ying)經過三級(ji)培(pei)養(yang)和(he)(he)收集藻(zao)水后才知(zhi)道(dao)近似數值）。
2—2低水(shui)位(wei)高密(mi)度(du)接(jie)種(zhong)（接(jie)種(zhong)密(mi)度(du)為(wei)P×10^5cell/ml,P為(wei)接(jie)種(zhong)密(mi)度(du)十(shi)萬位(wei)數值）（未特別說(shuo)明藻(zao)水(shui)藻(zao)細胞(bao)密(mi)度(du)就(jiu)是(shi)cell/ml）（以下的推理是(shi)建立在三級藻(zao)第(di)二次(ci)，第(di)三次(ci)加水(shui)和收獲的密(mi)度(du)為(wei)10^6級）。
若一(yi)天(tian)(tian)(tian)三(san)級(ji)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)需求量(liang)(liang)為(wei)(wei)(wei)(wei)A升，則(ze)總藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)目為(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)(wei)A升濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千萬(wan)位(wei)(wei)(wei)的(de)(de)數(shu)值(zhi)),一(yi)般情況下(xia)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)(de)密(mi)度(du)為(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)(wei)的(de)(de)數(shu)值(zhi)),若一(yi)天(tian)(tian)(tian)接(jie)種E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)，則(ze)一(yi)天(tian)(tian)(tian)需要二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第二(er)天(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)(jia)水(shui)(shui)F噸(dun)，此(ci)時(shi)加(jia)(jia)(jia)水(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)第二(er)天(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)(jia)F噸(dun)水(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)度(du)百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)(wei)數(shu)值(zhi)），然(ran)后第三(san)天(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)(jia)水(shui)(shui)G噸(dun)時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)密(mi)度(du)應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)度(du)百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)(wei)數(shu))，第四天(tian)(tian)(tian)或第五天(tian)(tian)(tian)收獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)目應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)度(du)百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)(wei)數(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)目)，因為(wei)(wei)(wei)(wei)總需求量(liang)(liang)的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)目應(ying)等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)目，則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經過計算是A×B=(E+F+G) ×10×W。(一(yi)般情況下(xia)E,F,G的(de)(de)值(zhi)接(jie)近)，則(ze)近似AB=300EW, 即若一(yi)天(tian)(tian)(tian)需要濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)A升，則(ze)每(mei)天(tian)(tian)(tian)應(ying)接(jie)種E=AB÷300W噸(dun)水(shui)(shui)。（W和(he)B的(de)(de)值(zhi)應(ying)經過實地三(san)級(ji)培養(yang)和(he)收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)后才(cai)知道近似數(shu)值(zhi)）。
