對蝦(xia)(xia)(xia)(xia)種苗(miao)企業(ye)的(de)(de)(de)(de)生(sheng)存(cun)主要是(shi)依(yi)靠(kao)蝦(xia)(xia)(xia)(xia)苗(miao)養(yang)殖(zhi)效果(guo)來決(jue)定的(de)(de)(de)(de)，蝦(xia)(xia)(xia)(xia)苗(miao)成活(huo)率(lv)的(de)(de)(de)(de)高低直接影響著產業(ye)鏈的(de)(de)(de)(de)上上下(xia)下(xia)。單(dan)胞藻(zao)對于(yu)(yu)蝦(xia)(xia)(xia)(xia)苗(miao)早期是(shi)最適合(he)(he)的(de)(de)(de)(de)餌(er)料(liao)，如果(guo)培育(yu)得當，不(bu)僅可以(yi)節約成本(ben)，減少(shao)育(yu)苗(miao)水(shui)體(ti)環(huan)境負荷(he)，尤其是(shi)對于(yu)(yu)蝦(xia)(xia)(xia)(xia)苗(miao)的(de)(de)(de)(de)發(fa)育(yu)打下(xia)堅實的(de)(de)(de)(de)基礎，提(ti)高成活(huo)率(lv)。結合(he)(he)個(ge)人(ren)(ren)的(de)(de)(de)(de)育(yu)苗(miao)感(gan)受，投喂單(dan)胞藻(zao)與不(bu)投喂的(de)(de)(de)(de)區別還是(shi)有(you)的(de)(de)(de)(de)，比(bi)如苗(miao)的(de)(de)(de)(de)變(bian)態時(shi)間縮短(duan)，活(huo)力個(ge)頭(tou)大(da)小，水(shui)質均(jun)優于(yu)(yu)未投喂單(dan)胞藻(zao)的(de)(de)(de)(de)苗(miao)，當然如果(guo)培育(yu)不(bu)得當，反作用也有(you)，比(bi)如投喂有(you)害菌超標的(de)(de)(de)(de)藻(zao)液(ye)，藻(zao)類老化，投喂過量(liang)等(deng)。所以(yi)合(he)(he)理(li)運用，方可收到理(li)想效果(guo)。限于(yu)(yu)個(ge)人(ren)(ren)水(shui)平，描述方法的(de)(de)(de)(de)錯誤不(bu)足之處，懇請大(da)家指(zhi)正。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超凈(jing)工作臺
使用(yong)前提(ti)前開機(ji)，打開紫(zi)外線燈和(he)風機(ji)開關20分鐘。超(chao)凈臺面(mian)上不(bu)存(cun)放不(bu)必要(yao)的(de)物品，保(bao)(bao)持工(gong)作(zuo)(zuo)(zuo)區內(nei)(nei)的(de)凈化(hua)氣流(liu)不(bu)受干擾，工(gong)作(zuo)(zuo)(zuo)時(shi)(shi)盡量避免(mian)作(zuo)(zuo)(zuo)明顯干擾氣流(liu)的(de)動(dong)作(zuo)(zuo)(zuo)；超(chao)凈臺保(bao)(bao)持光(guang)滑水(shui)平(ping)，光(guang)滑便于用(yong)酒(jiu)精消毒布擦(ca)，水(shui)平(ping)是倒培(pei)養(yang)基時(shi)(shi)使培(pei)養(yang)皿內(nei)(nei)平(ping)板厚(hou)度一致。工(gong)作(zuo)(zuo)(zuo)時(shi)(shi)超(chao)凈臺周圍空氣流(liu)動(dong)要(yao)緩慢(man)，雜(za)(za)菌(jun)盡量減(jian)少，所(suo)以要(yao)定(ding)期清潔消毒保(bao)(bao)種室(shi)內(nei)(nei)，關閉門窗，盡可(ke)能減(jian)少雜(za)(za)菌(jun)數量；空氣過(guo)濾網定(ding)期清潔。
（2）真空(kong)泵和(he)溶劑(ji)過濾器及(ji)過濾膜
此(ci)環節過濾只是為(wei)單胞藻(zao)純培養室(shi)（保(bao)種，提純，擴培試管級）準備清潔無(wu)菌海水。其他級別的培養無(wu)需此(ci)環節。
過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)膜使用(yong)0.2微米孔(kong)徑，不可用(yong)手(shou)拿，用(yong)鑷子選(xuan)取。真(zhen)(zhen)空(kong)泵(beng)與溶劑過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)器之間通過(guo)(guo)合適口徑的橡膠管連(lian)接(jie)緊密，每次過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)要注意濾(lv)(lv)(lv)膜的過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)效果，防止濾(lv)(lv)(lv)孔(kong)阻塞影響(xiang)過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)效果。濾(lv)(lv)(lv)瓶內的濾(lv)(lv)(lv)液不能沒過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)板出水口，否則濾(lv)(lv)(lv)液將被抽(chou)吸入真(zhen)(zhen)空(kong)泵(beng)，導(dao)致真(zhen)(zhen)空(kong)泵(beng)損壞(huai)。
應該使濾板內的營(ying)養液過濾盡后（無水滴）才能停泵。要定期注意真空泵內油量，注意加油。
(3) 恒溫鼓風干燥箱
設(she)(she)定溫度時(shi)。先(xian)按控溫儀功能(neng)鍵(jian)SET進入溫度設(she)(she)定狀(zhuang)態(tai)(tai)，此時(shi)SP設(she)(she)定顯(xian)示(shi)一(yi)閃(shan)一(yi)閃(shan)，要(yao)按移動位(wei)(wei)鍵(jian)配合加鍵(jian)或減鍵(jian)，設(she)(she)定時(shi)先(xian)從分位(wei)(wei)數字設(she)(she)定，一(yi)直到百位(wei)(wei)數，設(she)(she)定結(jie)束需按一(yi)下功能(neng)鍵(jian)SET,此時(shi)干燥箱(xiang)進入升溫狀(zhuang)態(tai)(tai)，加熱(re)指示(shi)燈(deng)亮，當箱(xiang)內溫度接(jie)近設(she)(she)定溫度時(shi)，加熱(re)指示(shi)燈(deng)閃(shan)動多次(ci)，控制(zhi)進入恒溫狀(zhuang)態(tai)(tai)。
使用注(zhu)意(yi)事項：物(wu)品不(bu)(bu)能堆(dui)得太(tai)滿，更不(bu)(bu)能堵住出風口，以免影響溫度(du)均勻上(shang)升。若(ruo)是有牛皮紙和保鮮膜時(shi)，溫度(du)不(bu)(bu)能超過(guo)180度(du)。取(qu)出物(wu)品時(shi)，箱內外溫差不(bu)(bu)宜過(guo)高(gao)，防止玻璃器皿炸裂。橡(xiang)膠制品不(bu)(bu)能放入(ru)。
（4）加濕器
配合生化培養箱使用。
水(shui)(shui)源是蒸餾水(shui)(shui)；不應容(rong)(rong)器(qi)內帶水(shui)(shui)移(yi)動加濕(shi)器(qi)；加水(shui)(shui)時應在(zai)容(rong)(rong)器(qi)上表示的滿水(shui)(shui)線為止。
應注意的事項：平(ping)時留意觀察(cha)水箱(xiang)的存水量，及(ji)時予以補充(chong)，遠離(li)熱源(yuan)，腐蝕物。
（5）蒸汽消毒(du)器(qi)
容器加(jia)水時(shi)，水位一定(ding)要超過(guo)電熱管，最好是到(dao)3個支撐點(dian)的下緣，如(ru)果連續使用，應在每(mei)次消(xiao)毒前補足(zu)蒸(zheng)發(fa)水量，不然少水會燒壞電熱管。蓋(gai)(gai)上的放(fang)氣(qi)(qi)軟管插(cha)入消(xiao)毒桶(tong)圓槽內，對正蓋(gai)(gai)和主體的螺(luo)栓(shuan)槽，依次將相對方(fang)的翼型螺(luo)母予以旋緊(jin)，使蓋(gai)(gai)與主體密合，加(jia)熱開始時(shi)，應將放(fang)氣(qi)(qi)閥(fa)與安(an)全閥(fa)的小手(shou)柄(bing)扳至垂直放(fang)氣(qi)(qi)方(fang)位，必須待有較急蒸(zheng)汽噴(pen)出，即(ji)將小手(shou)柄(bing)扳回水平“關閉”方(fang)位。
當到達所(suo)需壓力和溫度，計(ji)算消毒(du)時間(jian)，消毒(du)畢后，關閉電源，待壓力指針指向(xiang)0時，將放氣(qi)閥的小手柄扳至垂直放氣(qi)方位，氣(qi)放完后，打(da)開(kai)容器(qi)蓋。物品消毒(du)后要迅速(su)干燥。
應注意滅菌液體(ti)時(shi)，不超過盛液體(ti)容器體(ti)積的(de)3/4，瓶塞(sai)(sai)不可(ke)用軟木塞(sai)(sai)或未打孔的(de)橡(xiang)膠(jiao)塞(sai)(sai)。滅菌器內(nei)冷空(kong)氣(qi)必須完全排除。因為空(kong)氣(qi)的(de)膨脹(zhang)壓(ya)大于水(shui)蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)的(de)膨脹(zhang)壓(ya)，當(dang)水(shui)蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)含冷空(kong)氣(qi)時(shi)，壓(ya)力(li)(li)表(biao)所表(biao)示的(de)壓(ya)力(li)(li)是(shi)水(shui)蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)壓(ya)力(li)(li)和部分冷空(kong)氣(qi)壓(ya)力(li)(li)之和，不是(shi)水(shui)蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)的(de)實際壓(ya)力(li)(li)，而同(tong)一壓(ya)力(li)(li)下的(de)實際溫(wen)度(du)，含空(kong)氣(qi)的(de)蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽低于飽和蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽，這樣導(dao)致達不了消毒效果。絕不可(ke)堵塞(sai)(sai)安全閥出氣(qi)孔，必須留空(kong)位保證(zheng)其暢通(tong)放氣(qi)，發現超溫(wen)超壓(ya)，立(li)即斷(duan)電。
蒸餾器
先關閉放(fang)水(shui)(shui)(shui)閥，打開進水(shui)(shui)(shui)閥，待(dai)溢(yi)水(shui)(shui)(shui)皮(pi)管(guan)有(you)水(shui)(shui)(shui)流出，方可接通電源，此(ci)時可暫時關閉進水(shui)(shui)(shui)閥，待(dai)出水(shui)(shui)(shui)皮(pi)管(guan)有(you)蒸餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)流出，打開進水(shui)(shui)(shui)閥，制備(bei)蒸餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)。定期清(qing)洗(xi)蒸餾(liu)(liu)器內(nei)壁(bi)，除去水(shui)(shui)(shui)垢，不然影響蒸餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)質量和使用效果(guo)。切(qie)不可關閉水(shui)(shui)(shui)閥制備(bei)蒸餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)，否則(ze)燒壞(huai)電熱管(guan)。
（6）鼓風機
定期更換吸氣口的過濾(lv)棉，異常情(qing)況，請電工(gong)檢查。
（7）空調(diao)
保種(zhong)室若(ruo)有生長(chang)藻(zao)種(zhong)，需維持恒定溫度，反之(zhi)關閉(bi)。一(yi)級(ji)，二級(ji)空(kong)調(diao)視外界氣(qi)溫調(diao)整開關。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾(lv)(lv)水(shui)筒式(shi)過濾(lv)(lv)器(qi)。筒式(shi)過濾(lv)(lv)器(qi)的濾(lv)(lv)芯應用(yong)一(yi)次更換(huan)一(yi)次，用(yong)過的濾(lv)(lv)芯浸泡在1%鹽(yan)酸溶(rong)液中消毒12h以上。然(ran)后用(yong)洗(xi)潔精清洗(xi)，再用(yong)足量清水(shui)沖洗(xi)干凈，晾干備(bei)用(yong)。（濾(lv)(lv)芯規格(ge)應小于等于0.5微米(mi)）。
2、試(shi)管(guan)（規格10毫升(sheng)(sheng)到20毫升(sheng)(sheng)），錐形(xing)瓶(ping)（50毫升(sheng)(sheng)到200毫升(sheng)(sheng)），500ml錐形(xing)瓶(ping)，2.5L瓶(ping)廣口瓶(ping)，移(yi)液管(guan)，移(yi)液槍管(guan)/盒，玻璃氣(qi)(qi)管(guan)，膠(jiao)氣(qi)(qi)管(guan)，氣(qi)(qi)石，溶劑過濾(lv)器，培養皿(min)。用(yong)(yong)(yong)過后(hou)應當用(yong)(yong)(yong)清(qing)水(shui)清(qing)洗(xi)(xi)后(hou)浸泡于1% 鹽酸12h以上（溶劑過濾(lv)器除外(wai)，浸泡時(shi)相(xiang)近大小器皿(min)分類放不(bu)同的消(xiao)毒桶(tong)，規格相(xiang)差(cha)大，易(yi)導致相(xiang)互碰(peng)撞(zhuang)碎(sui)爛）然后(hou)用(yong)(yong)(yong)洗(xi)(xi)潔精清(qing)洗(xi)(xi)(用(yong)(yong)(yong)毛刷清(qing)洗(xi)(xi)試(shi)管(guan)底部時(shi)，不(bu)可(ke)太用(yong)(yong)(yong)力，否則底部易(yi)破裂)，再用(yong)(yong)(yong)大量清(qing)水(shui)沖洗(xi)(xi)干凈，風干或曬干，高壓(ya)滅菌后(hou)，放入恒溫(wen)干燥(zao)(zao)箱（膠(jiao)氣(qi)(qi)管(guan)，氣(qi)(qi)石除外(wai)）干燥(zao)(zao)備用(yong)(yong)(yong)。
3、聚(ju)乙烯藻(zao)袋用于(yu)二級藻(zao)類藻(zao)種掛(gua)袋培(pei)養或3級擴培(pei)（一般使用盛裝藻(zao)液12升左(zuo)右）。先用清水(shui)沖洗(xi)(xi)干凈內外(wai)，浸泡于(yu)1% 鹽酸(suan)12h以(yi)上，再(zai)用大量清水(shui)沖洗(xi)(xi)干凈，風干或曬干，備用。由于(yu)藻(zao)袋近似密封性，對于(yu)防(fang)止微(wei)生物污染有很好的效果(guo)。
4、毛(mao)巾、保種室，一級和二級毛(mao)巾不可(ke)混用，所用毛(mao)巾后都(dou)應消(xiao)毒清洗晾干(gan)后備用。
5、錫箔紙：除非粘上(shang)油(you)污或污物以及破損，都(dou)應重復使用。
6、牛(niu)皮紙(zhi)：定期(qi)拿到烘箱烘干。
7、定期(qi)更換空(kong)氣過濾器（用(yong)于(yu)1，2級培(pei)養的(de)進(jin)氣過濾）的(de)濾芯，濾芯已油(you)化或沖散的(de)棄去。
8、定期更換鼓風(feng)(feng)機進風(feng)(feng)口的過濾棉(mian)。
9、對新購入(ru)的(de)(de)器皿應先除去(qu)包(bao)裝沾染(ran)的(de)(de)污垢(gou)后，用(yong)洗(xi)潔精刷洗(xi)，流水(shui)沖凈，再(zai)浸(jin)泡于1%的(de)(de)鹽(yan)酸12h，使(shi)游離的(de)(de)堿性物(wu)質除去(qu)，再(zai)用(yong)清水(shui)沖洗(xi)干(gan)凈，風干(gan)或曬干(gan)備用(yong)。
室內衛生消毒
1、保種(zhong)(zhong)室每天早(zao)上用(yong)清水(shui)擦洗實(shi)驗臺面(mian)，地(di)板，墻(qiang)壁，木架(jia)后，開(kai)紫外燈消毒20分鐘(zhong)，此(ci)時關(guan)掉(diao)空調，關(guan)掉(diao)日光燈，由于紫外燈照射會(hui)產生(sheng)一定量的臭氧，對人體有(you)害，所(suo)以(yi)消毒關(guan)閉紫外燈后人應隔一段時間再進(jin)去(qu)。進(jin)保種(zhong)(zhong)室換鞋。
2、一(yi)級(ji)(ji)和(he)二級(ji)(ji)室每天清潔，接(jie)種前(qian)接(jie)種后承載(zai)物框架都(dou)應用(yong)消毒液消毒。
3、門口(kou)消毒(du)池定期更換消毒(du)藥水（高錳酸鉀）。
4、常用消毒(du)劑濃度(du) 1%鹽酸(suan)，次氯酸(suan)鈉(na)20ppm（有效氯），碘(dian)液（1000ppm）,酒精70-75%,高錳酸(suan)鉀1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所(suo)需燒杯，玻棒須清(qing)洗干凈，錐(zhui)形瓶和(he)培養皿須消毒(du)清(qing)洗滅(mie)菌烘干。將稱好的(de)(de)(de)(de)純化瓊脂(zhi)(zhi)粉加(jia)(jia)(jia)入(ru)燒杯再(zai)加(jia)(jia)(jia)入(ru)一定量的(de)(de)(de)(de)海水(shui)，加(jia)(jia)(jia)熱（必(bi)須不停攪拌，以(yi)免瓊脂(zhi)(zhi)糊底燒焦(jiao)）至(zhi)完全融化，加(jia)(jia)(jia)熱后的(de)(de)(de)(de)瓊脂(zhi)(zhi)培養基(ji)(ji)應當透(tou)明無顯(xian)著沉(chen)淀，若明顯(xian)，可采(cai)用清(qing)潔(jie)的(de)(de)(de)(de)白(bai)色薄絨布或中間夾有薄層(ceng)吸水(shui)棉的(de)(de)(de)(de)雙層(ceng)紗(sha)布鋪在漏斗上趁熱過(guo)濾，融化畢后精確加(jia)(jia)(jia)入(ru)營養鹽(yan)（維(wei)生素(su)B溶液須等(deng)培養基(ji)(ji)高壓滅(mie)菌后冷卻至(zhi)50攝(she)氏度以(yi)下再(zai)加(jia)(jia)(jia)）。
培(pei)養(yang)基(ji)采用121攝氏度高壓(ya)蒸汽滅菌20至(zhi)30分鐘即(ji)(ji)可(ke)，培(pei)養(yang)基(ji)滅菌后(hou)應立即(ji)(ji)取(qu)出，冷卻至(zhi)50攝氏度以下，即(ji)(ji)加維生(sheng)素(su)B溶液。將(jiang)盛裝培(pei)養(yang)基(ji)的錐(zhui)形(xing)瓶(ping)和培(pei)養(yang)皿(min)(min)放(fang)在超凈工作臺(tai)上，點(dian)燃(ran)酒精燈，右手托(tuo)起錐(zhui)形(xing)瓶(ping)底，將(jiang)瓶(ping)口(kou)在酒精燈稍加燒(shao)，然后(hou)迅速將(jiang)培(pei)養(yang)基(ji)倒入培(pei)養(yang)皿(min)(min)中，以鋪(pu)(pu)滿(man)皿(min)(min)底為止(zhi)（厚薄適中）。鋪(pu)(pu)放(fang)好后(hou)，放(fang)置20-30分鐘，待(dai)培(pei)養(yang)基(ji)凝固(gu)后(hou)，即(ji)(ji)開(kai)始操作。
若是(shi)做斜(xie)面培(pei)(pei)養基(ji)，則加入維(wei)生(sheng)素B溶液后(hou)，將盛裝(zhuang)培(pei)(pei)養基(ji)的錐形(xing)瓶和(he)試管(guan)以(yi)及一根厚約1厘米的小木(mu)板放在(zai)超凈工作臺上。分裝(zhuang)約為試管(guan)高度的1/3-2/3（視情(qing)況操(cao)作），分裝(zhuang)量(liang)應(ying)以(yi)能形(xing)成2/3底(di)層和(he)1/3斜(xie)面量(liang)為好(hao)(hao)，擺(bai)置(zhi)成適當斜(xie)面，待(dai)其自然凝固。培(pei)(pei)養基(ji)制備(bei)好(hao)(hao)后(hou)，如(ru)發現破裂，水分浸(jin)入，色澤(ze)異常等均應(ying)棄去.
待凝固后即進行操(cao)作，現(xian)一般(ban)采用平板(ban)劃(hua)線接種(zhong)和涂布接種(zhong)。
平板劃線接種
接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)在(zai)酒精(jing)燈(deng)火焰上充分燒紅后(hou)(hou)，接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)柄一(yi)(yi)邊轉動(dong)一(yi)(yi)邊慢慢來回通過(guo)火焰3次，待冷卻至室溫方(fang)可(ke)挑(tiao)取藻種(zhong)(zhong)(zhong)（為保(bao)證藻種(zhong)(zhong)(zhong)不(bu)被燙死，挑(tiao)種(zhong)(zhong)(zhong)前可(ke)將(jiang)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)觸(chu)培(pei)養(yang)(yang)皿內壁(bi)或(huo)培(pei)養(yang)(yang)基），迅速(su)(su)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)至新培(pei)養(yang)(yang)基（劃(hua)線(xian)可(ke)采(cai)用斜線(xian)法(fa)(fa)，方(fang)格法(fa)(fa)，曲線(xian)法(fa)(fa)，放射法(fa)(fa)等）。左(zuo)(zuo)手握住平(ping)板(ban)(ban)，用大(da)(da)拇(mu)(mu)指(zhi)和(he)食指(zhi)稍稍抬起皿蓋，同時(shi)(shi)靠近火焰周圍，右(you)手持接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)伸(shen)(shen)入皿內，在(zai)平(ping)板(ban)(ban)上一(yi)(yi)個(ge)區(qu)域作(zuo)劃(hua)線(xian)（依方(fang)法(fa)(fa)不(bu)同，動(dong)作(zuo)不(bu)同）。劃(hua)線(xian)時(shi)(shi)使接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)與(yu)平(ping)板(ban)(ban)表面成(cheng)30-40度角(jiao)輕(qing)輕(qing)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)觸(chu)，以腕力(li)在(zai)表面作(zuo)較快的滑動(dong)（注(zhu)意不(bu)要(yao)劃(hua)破平(ping)板(ban)(ban)表面或(huo)伸(shen)(shen)進培(pei)養(yang)(yang)基內）。接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)挑(tiao)種(zhong)(zhong)(zhong)后(hou)(hou)和(he)劃(hua)線(xian)完抽(chou)出時(shi)(shi)均不(bu)可(ke)碰及皿壁(bi)/口，更(geng)不(bu)能碰其它物體(ti)和(he)臺面。接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)完后(hou)(hou)，將(jiang)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)從柄部至環(huan)(huan)(huan)端(duan)逐漸通過(guo)酒精(jing)燈(deng)火焰滅菌，不(bu)能直接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)燒環(huan)(huan)(huan)，以免(mian)殘留在(zai)接(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)上的藻體(ti)或(huo)菌體(ti)爆(bao)濺(jian)污染空間。上述操作(zuo)完成(cheng)后(hou)(hou)，即用無菌封(feng)口膜封(feng)培(pei)養(yang)(yang)皿口（膜使用前須(xu)用酒精(jing)消毒(du)，紫外燈(deng)消毒(du)，風(feng)干），封(feng)口時(shi)(shi)，用左(zuo)(zuo)手大(da)(da)拇(mu)(mu)指(zhi)摁住膜一(yi)(yi)邊末端(duan)，右(you)手大(da)(da)拇(mu)(mu)指(zhi)和(he)食指(zhi)捏住另一(yi)(yi)邊末端(duan)，迅速(su)(su)繞培(pei)養(yang)(yang)皿口繞一(yi)(yi)圈，封(feng)口。
涂(tu)布接種(zhong)
所用種液必須經過弧菌檢(jian)測合格(ge)后方(fang)可(ke)使用。涂布(bu)棒(bang)在火(huo)焰(yan)上(shang)慢慢來回(hui)過火(huo)焰(yan)3次，冷(leng)卻(que)（不(bu)可(ke)驟冷(leng)），將種液用移(yi)液槍(qiang)從試管吸出(chu)注入平板(ban)上(shang)面（槍(qiang)管不(bu)可(ke)碰及(ji)試管外壁，更(geng)不(bu)能碰及(ji)其它(ta)物品或(huo)臺(tai)面），迅速用涂布(bu)棒(bang)在表面作來回(hui)左(zuo)右的涂布(bu)，讓藻液分布(bu)均勻，畢后，封口同平板(ban)劃(hua)線。
試管液體培養基接種
所用種液(ye)必須經過弧菌(jun)檢(jian)測合格后(hou)方可使用。火焰(yan)滅(mie)菌(jun)前試(shi)(shi)(shi)管(guan)口(kou)(kou)(kou)外壁不(bu)能(neng)有水滴（易導(dao)致受熱不(bu)均(jun)而破(po)裂）,燒試(shi)(shi)(shi)管(guan)口(kou)(kou)(kou)時(shi)(shi)，試(shi)(shi)(shi)管(guan)傾斜45度角(jiao)，不(bu)斷移動(dong)試(shi)(shi)(shi)管(guan)，使試(shi)(shi)(shi)管(guan)口(kou)(kou)(kou)受熱均(jun)勻，滅(mie)菌(jun)時(shi)(shi)間3秒左右。滅(mie)菌(jun)后(hou)不(bu)能(neng)驟(zou)冷，防止試(shi)(shi)(shi)管(guan)破(po)裂。畢后(hou)，用盛裝營(ying)養液(ye)150或200ml的錐形瓶（也要滅(mie)菌(jun)瓶口(kou)(kou)(kou)）向試(shi)(shi)(shi)管(guan)中(zhong)傾倒營(ying)養液(ye)，每次只能(neng)拿一個試(shi)(shi)(shi)管(guan)（注：若(ruo)幾個試(shi)(shi)(shi)管(guan)對比時(shi)(shi)，可以同時(shi)(shi)拿在(zai)手里，用大拇指(zhi)和手掌），倒好后(hou)，同樣試(shi)(shi)(shi)管(guan)和錐形瓶口(kou)(kou)(kou)滅(mie)菌(jun)，試(shi)(shi)(shi)管(guan)塞(sai)(sai)(sai)也要滅(mie)菌(jun)，塞(sai)(sai)(sai)試(shi)(shi)(shi)管(guan)塞(sai)(sai)(sai)時(shi)(shi)不(bu)要移動(dong)試(shi)(shi)(shi)管(guan)迎接塞(sai)(sai)(sai)，以免試(shi)(shi)(shi)管(guan)在(zai)移動(dong)中(zhong)納(na)入(ru)可能(neng)含菌(jun)空氣(qi)，火焰(yan)旁(pang)為無菌(jun)。
所有(you)試(shi)管(guan)(guan)(guan)分(fen)裝好后(hou)，即接(jie)種(zhong)。用移(yi)液槍選(xuan)(xuan)取移(yi)液量（試(shi)管(guan)(guan)(guan)口滅菌），注入(ru)新培(pei)養(yang)基，槍管(guan)(guan)(guan)不(bu)(bu)可碰及管(guan)(guan)(guan)外(wai)壁(bi)，更不(bu)(bu)能(neng)碰及其(qi)它物品或臺面，一(yi)支槍管(guan)(guan)(guan)只能(neng)和同一(yi)種(zhong)液使(shi)(shi)用，選(xuan)(xuan)取另一(yi)試(shi)管(guan)(guan)(guan)種(zhong)液時必須更換(huan)槍頭。接(jie)種(zhong)畢后(hou)，選(xuan)(xuan)取合適光(guang)照溫度培(pei)養(yang)。由于試(shi)管(guan)(guan)(guan)培(pei)養(yang)是(shi)靜置培(pei)養(yang)，而(er)在(zai)靜置條件下，藻(zao)(zao)細(xi)胞(bao)會聚集(ji)在(zai)試(shi)管(guan)(guan)(guan)底(di)部，且藻(zao)(zao)細(xi)胞(bao)周圍會形成透過(guo)養(yang)分(fen)的屏(ping)障，營(ying)(ying)養(yang)鹽的攝入(ru)受阻，光(guang)照吸收不(bu)(bu)均(jun)，為使(shi)(shi)營(ying)(ying)養(yang)鹽攝入(ru)正(zheng)常，藻(zao)(zao)細(xi)胞(bao)受光(guang)均(jun)勻，需要(yao)定時搖置試(shi)管(guan)(guan)(guan)（手先噴消毒(du)酒精，手腕使(shi)(shi)勁搖，不(bu)(bu)要(yao)擺臂，不(bu)(bu)能(neng)倒置搖）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三角瓶(ping)接種需(xu)無菌(jun)操(cao)作。500ml瓶(ping)，2.5L瓶(ping)液體培(pei)養(yang)(yang)基接種均(jun)在(zai)室內衛(wei)生條件下操(cao)作。3種瓶(ping)和所(suo)需(xu)營養(yang)(yang)液及(ji)錫(xi)紙(zhi)，移液管，洗耳(er)球，氣管，氣石均(jun)需(xu)經消毒清洗，滅菌(jun)后(hou)使(shi)用。三角瓶(ping)需(xu)定時(shi)搖置(zhi)，500ml，2.5L瓶(ping)培(pei)養(yang)(yang)在(zai)通氣條件下培(pei)養(yang)(yang)。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣管，氣石均需經消(xiao)毒(du)(du)清洗(xi)，滅菌(jun)后(hou)使(shi)用(yong)(yong)，抽藻管前次用(yong)(yong)畢后(hou)應(ying)當(dang)(dang)用(yong)(yong)水(shui)(shui)泵將管內(nei)灌滿消(xiao)毒(du)(du)鹽酸溶(rong)液，今次用(yong)(yong)前需用(yong)(yong)海水(shui)(shui)或淡水(shui)(shui)沖洗(xi)干凈(jing)后(hou)使(shi)用(yong)(yong)。選(xuan)取(qu)的(de)種液應(ying)當(dang)(dang)是(shi)無明(ming)顯沉淀，泡沫，原生動物，附著物，色澤(ze)正常(chang)(chang)，藻細(xi)胞密度大，形態正常(chang)(chang)，弧菌(jun)檢(jian)測合(he)格后(hou)選(xuan)用(yong)(yong)。所用(yong)(yong)海水(shui)(shui)漂白水(shui)(shui)消(xiao)毒(du)(du)有效氯(lv)應(ying)足10ppm，曝氣12小時，檢(jian)測余氯(lv)，加(jia)硫代硫酸鈉中和，方可使(shi)用(yong)(yong)。若使(shi)用(yong)(yong)稀釋(shi)的(de)漂白水(shui)(shui)，應(ying)當(dang)(dang)天配制當(dang)(dang)天使(shi)用(yong)(yong)，而未使(shi)用(yong)(yong)的(de)要在24小時后(hou)棄去。且稀釋(shi)的(de)漂白水(shui)(shui)必須(xu)加(jia)蓋(gai)放(fang)在避光(guang)的(de)容器內(nei)保存。由于漂白水(shui)(shui)會隨時間漸漸分解，一次性購入的(de)漂白水(shui)(shui)不應(ying)太多，不要過量儲存，以免影(ying)響滅菌(jun)功效。
1,2，3級接藻示意
試管→三(san)角瓶→500ml瓶子(zi)→2500ml瓶子(zi)→20升的(de)藻(zao)(zao)種聚乙烯袋(dai) →18升的(de)擴培(pei)藻(zao)(zao)聚乙烯袋(dai)或者培(pei)藻(zao)(zao)池
相關說明
1、母液(ye)(ye)的(de)配(pei)置(zhi)可以(yi)參考教科書上所寫，然后(hou)結(jie)合當地的(de)水質(zhi)適當修改即可。氮，磷(lin)，鐵元(yuan)素，維生素B1,B12是必須(xu)使用,維生素母液(ye)(ye)保存于低溫弱光環(huan)境下，其中(zhong)維生素的(de)添(tian)加(jia)需要先高壓滅菌后(hou)再(zai)加(jia)入母液(ye)(ye)中(zhong)。其余營(ying)養鹽先配(pei)置(zhi)好后(hou)，再(zai)滅菌。如果是硅藻類(lei)，還應加(jia)上硅酸鈉。
2、保種室所需營養(yang)液(ye)（母液(ye)千分之(zhi)0.8的比例添(tian)加）除需高壓滅菌外還必須經過真空泵(beng)抽濾(lv)(lv)后才能用(yong)，微(wei)孔(kong)濾(lv)(lv)膜直徑(jing)為50毫(hao)米，孔(kong)徑(jing)為0.2微(wei)米。
3、接種(zhong)比例A:試管(guan)0.07—0.09（隨密度(du)大小變化），10毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)試管(guan)加(jia)營養液(ye)7毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，藻(zao)種(zhong)0.5毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，20毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)試管(guan)中營養液(ye)加(jia)12.5毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)營養液(ye)，1毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)藻(zao)種(zhong)。B:三(san)角瓶(ping)0.09-0.11。在100毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，150毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，200毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，250毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)三(san)角瓶(ping)中分(fen)別加(jia)營養液(ye)，70，80，120，150毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)（可按一(yi)試管(guan)對(dui)(dui)應一(yi)個(ge)三(san)角瓶(ping)加(jia)入(ru)），C: 500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)（400毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)營養液(ye)）(按1個(ge)三(san)角瓶(ping)對(dui)(dui)應1個(ge)500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)加(jia)入(ru))D:2.5升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)（2升(sheng)(sheng)(sheng)營養液(ye)）（按1個(ge)500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)對(dui)(dui)應1個(ge)2.5升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)加(jia)入(ru)），注意：上述若發(fa)現藻(zao)生長情況不好，需(xu)要先(xian)鏡檢，判斷(duan)后再決定(ding)是否接種(zhong)。
一般情況下3袋二(er)級藻(zao)種(zhong)應先擴培接(jie)種(zhong)于容量400升的桶（海水貯備及營養液提前配(pei)置好），然后立(li)即進行(xing)二(er)級藻(zao)袋擴種(zhong)，每個聚乙烯袋加18升左(zuo)右藻(zao)水。
4、保種(zhong)(zhong)培養(yang)(yang)基(ji)制備(bei)：按1.5%的比例加瓊脂(zhi)粉，煮沸后加營養(yang)(yang)鹽(yan)（母(mu)液(ye)千(qian)分之1添加），高(gao)(gao)壓滅菌。維生素需高(gao)(gao)壓滅菌后培養(yang)(yang)基(ji)冷卻至(zhi)30攝氏度方可加入。（可用(yong)劃線法，涂布(bu)法等(deng)分離培養(yang)(yang)藻種(zhong)(zhong)）。
5、儀器的清(qing)(qing)洗維護。溶劑過濾器使用后(hou)(hou)(hou)只用洗潔精和(he)清(qing)(qing)水清(qing)(qing)洗。高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)后(hou)(hou)(hou)備用。其它(ta)玻璃儀器，氣管(guan)，氣石，移液槍(qiang)筒使用后(hou)(hou)(hou)需要浸泡(pao)在(zai)百分之一到(dao)百分之十的稀鹽酸溶液中至少半天，才能拿出清(qing)(qing)洗，風(feng)干，高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)后(hou)(hou)(hou)備用。
說明：10的(de)2次方(fang)標示成10^2，以下數字(zi)的(de)次方(fang)通用此(ci)表示法(fa)
三級藻生產
三(san)級藻(zao)系統包括用水處理(li)以(yi)及配送(song)，溫度(du)與光照控制，藻(zao)種的(de)供(gong)應(ying)等(deng)。為(wei)確保擴大培(pei)(pei)(pei)養成(cheng)功，從接種到收獲(huo)的(de)培(pei)(pei)(pei)養時間應(ying)該盡量(liang)縮短，以(yi)避免因為(wei)開(kai)放式培(pei)(pei)(pei)養隨培(pei)(pei)(pei)養規(gui)模擴大接觸(chu)外(wai)界感染源時間加長，三(san)級藻(zao)池滋生過(guo)多(duo)的(de)有(you)害生物，使三(san)級培(pei)(pei)(pei)養失敗。
1—1高水(shui)(shui)位低(di)密(mi)度接種(zhong)（接種(zhong)密(mi)度為P×10^4cell/ml,P為接種(zhong)密(mi)度萬位數(shu)值）（未特別說明藻(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)細胞密(mi)度就是(shi)cell/ml）（以下(xia)的推理是(shi)建立在三級藻(zao)(zao)第(di)二次加水(shui)(shui)和(he)收獲的密(mi)度為105級）
若一天(tian)(tian)三(san)(san)級(ji)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)，則(ze)總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)目(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所(suo)含的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千(qian)萬位(wei)(wei)的(de)(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)),一般情況(kuang)下(xia)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)(de)(de)密(mi)度(du)為(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百萬位(wei)(wei)的(de)(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)),若第(di)(di)一天(tian)(tian)接種E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)，則(ze)一天(tian)(tian)需(xu)要二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積(ji)d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升(sheng)，第(di)(di)三(san)(san)天(tian)(tian)加(jia)水(shui)F噸(dun)，此時(shi)加(jia)水(shui)后(hou)(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)第(di)(di)三(san)(san)天(tian)(tian)加(jia)F噸(dun)水(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)十(shi)萬位(wei)(wei)數(shu)(shu)值(zhi)），然后(hou)(hou)(hou)第(di)(di)五天(tian)(tian)收獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)目(mu)應為(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)十(shi)萬位(wei)(wei)數(shu)(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)目(mu))，因為(wei)(wei)(wei)(wei)總(zong)需(xu)求量的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)目(mu)應等于最后(hou)(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)目(mu)，則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經(jing)過計算(suan)是A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若一(yi)天(tian)需濃縮(suo)藻(zao)(zao)320升，則(ze)(ze)A=320，(一(yi)般情況下(xia)E和F的值接(jie)近(jin))，則(ze)(ze)因為K=H,所(suo)以320×B=20EZ,即(ji)(ji)320B=20EZ，E=16B/Z,即(ji)(ji)B/Z噸藻(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)水(shui)可以收集濃縮(suo)藻(zao)(zao)20升(B為濃縮(suo)藻(zao)(zao)密度千萬位的數值,Z為藻(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)水(shui)密度十萬位數)，即(ji)(ji)若一(yi)天(tian)需要(yao)濃縮(suo)藻(zao)(zao)A升，則(ze)(ze)每天(tian)應接(jie)種E=AB÷20Z噸水(shui)。（Z和B的值應經過三級培養和收集藻(zao)(zao)水(shui)后才知道近(jin)似(si)數值）。
1—2高水(shui)位低密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)接種（接種密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)為(wei)P×10^4cell/ml,P為(wei)接種密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)萬位數值(zhi)）（未特(te)別(bie)說明的(de)藻(zao)水(shui)藻(zao)細胞密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)就是(shi)cell/ml）（以下的(de)推理是(shi)建立在三級藻(zao)第二(er)次(ci)加水(shui)和收獲(huo)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)為(wei)10^6級）。
若(ruo)(ruo)一(yi)天(tian)三級(ji)(ji)(ji)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)，則(ze)(ze)總藻(zao)(zao)(zao)細胞數(shu)目(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)所含的藻(zao)(zao)(zao)細胞數(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)千(qian)萬位的數(shu)值(zhi)),一(yi)般(ban)情(qing)況下二級(ji)(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)種的密(mi)(mi)度(du)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)二級(ji)(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)百萬位的數(shu)值(zhi)),若(ruo)(ruo)一(yi)天(tian)接(jie)(jie)種E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)，則(ze)(ze)一(yi)天(tian)需(xu)要二級(ji)(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升(sheng)，第(di)三天(tian)加水(shui)F噸(dun)，此時加水(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)第(di)三天(tian)加F噸(dun)水(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度(du)百萬位數(shu)值(zhi)），然(ran)后(hou)第(di)五天(tian)收獲(huo)時，藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)細胞總數(shu)目(mu)應(ying)(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度(du)百萬位數(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)細胞總數(shu)目(mu))，因為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)總需(xu)求量的藻(zao)(zao)(zao)細胞數(shu)目(mu)應(ying)(ying)等于最(zui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)細胞總數(shu)目(mu)，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze) A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經(jing)過(guo)(guo)計算是A×B=(E+F) ×100×Z, (一(yi)般(ban)情(qing)況下E和F的值(zhi)接(jie)(jie)近(jin))，則(ze)(ze)近(jin)似AB=200EZ, 即若(ruo)(ruo)一(yi)天(tian)需(xu)要濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)A升(sheng)，則(ze)(ze)每天(tian)應(ying)(ying)接(jie)(jie)種E=AB÷200Z噸(dun)水(shui)。（Z和B的值(zhi)應(ying)(ying)經(jing)過(guo)(guo)三級(ji)(ji)(ji)培養和收集藻(zao)(zao)(zao)水(shui)后(hou)才知道近(jin)似數(shu)值(zhi)）。
2—1低水位高(gao)密度接(jie)(jie)種（接(jie)(jie)種密度為(wei)P×10^5cell/ml,P為(wei)接(jie)(jie)種密度十萬位數(shu)值）（未(wei)特別(bie)說明(ming)藻水藻細胞密度就是cell/ml）（以下(xia)的推理是建立在三級藻第(di)二次，第(di)三次加水和收獲的密度為(wei)105級）。
若(ruo)一天(tian)三級(ji)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求量為(wei)A升(sheng)，則總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)為(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)A升(sheng)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所(suo)含(han)的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)千萬(wan)位(wei)的數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)),一般情(qing)況下(xia)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)為(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)百萬(wan)位(wei)的數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)),若(ruo)第(di)(di)一天(tian)接種(zhong)E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)，則一天(tian)需要二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體積(ji)d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升(sheng)，第(di)(di)二(er)天(tian)加水(shui)(shui)F噸，此時加水(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)第(di)(di)二(er)天(tian)加F噸水(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)十萬(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)），然(ran)后第(di)(di)三天(tian)加水(shui)(shui)G噸時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)應(ying)(ying)為(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)十萬(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu))，第(di)(di)四天(tian)或第(di)(di)五(wu)天(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)應(ying)(ying)為(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)十萬(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu),H為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu))，因為(wei)總(zong)需求量的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)應(ying)(ying)等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)。
則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經(jing)過計算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一(yi)般情況下E,F,G的值接近(jin))，則(ze)近(jin)似AB=30EW, 即若一(yi)天需要(yao)濃縮(suo)藻(zao)A升，則(ze)每(mei)天應接種E=AB÷30W噸水。（W和(he)B的值應經過(guo)三(san)級(ji)培養和(he)收(shou)集(ji)藻(zao)水后(hou)才知(zhi)道近(jin)似數值）。
2—2低水(shui)(shui)位高密(mi)度(du)(du)(du)接種(zhong)(zhong)（接種(zhong)(zhong)密(mi)度(du)(du)(du)為(wei)P×10^5cell/ml,P為(wei)接種(zhong)(zhong)密(mi)度(du)(du)(du)十萬位數值(zhi)）（未特別說明藻水(shui)(shui)藻細胞密(mi)度(du)(du)(du)就是(shi)cell/ml）（以下的(de)推理是(shi)建立在三級(ji)藻第(di)二次(ci)，第(di)三次(ci)加水(shui)(shui)和收獲的(de)密(mi)度(du)(du)(du)為(wei)10^6級(ji)）。
若一天(tian)(tian)(tian)(tian)三(san)級濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求量(liang)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升，則(ze)總(zong)(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數目(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)千(qian)萬位(wei)的(de)(de)數值(zhi)),一般情況下(xia)二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的(de)(de)密(mi)(mi)度(du)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)百(bai)萬位(wei)的(de)(de)數值(zhi)),若一天(tian)(tian)(tian)(tian)接(jie)種(zhong)E噸(dun)(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)，則(ze)一天(tian)(tian)(tian)(tian)需要二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第二(er)天(tian)(tian)(tian)(tian)加水(shui)(shui)(shui)F噸(dun)(dun)，此(ci)時(shi)(shi)加水(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)第二(er)天(tian)(tian)(tian)(tian)加F噸(dun)(dun)水(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)百(bai)萬位(wei)數值(zhi)），然(ran)后第三(san)天(tian)(tian)(tian)(tian)加水(shui)(shui)(shui)G噸(dun)(dun)時(shi)(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)密(mi)(mi)度(du)應為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)百(bai)萬位(wei)數)，第四天(tian)(tian)(tian)(tian)或第五天(tian)(tian)(tian)(tian)收獲時(shi)(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)總(zong)(zong)數目(mu)應為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)百(bai)萬位(wei)數,H為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)總(zong)(zong)數目(mu))，因為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)總(zong)(zong)需求量(liang)的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數目(mu)應等于最(zui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)總(zong)(zong)數目(mu)，則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經過計(ji)算是A×B=(E+F+G) ×10×W。(一般情況下(xia)E,F,G的(de)(de)值(zhi)接(jie)近(jin))，則(ze)近(jin)似AB=300EW, 即若一天(tian)(tian)(tian)(tian)需要濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升，則(ze)每(mei)天(tian)(tian)(tian)(tian)應接(jie)種(zhong)E=AB÷300W噸(dun)(dun)水(shui)(shui)(shui)。（W和B的(de)(de)值(zhi)應經過實地三(san)級培養和收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)后才知道近(jin)似數值(zhi)）。
