對(dui)蝦(xia)(xia)(xia)種苗(miao)(miao)企業的(de)生存主(zhu)要(yao)是依靠(kao)蝦(xia)(xia)(xia)苗(miao)(miao)養殖效(xiao)果來決定的(de)，蝦(xia)(xia)(xia)苗(miao)(miao)成活(huo)率(lv)的(de)高(gao)低直接(jie)影(ying)響著產業鏈的(de)上上下下。單(dan)胞(bao)藻(zao)對(dui)于蝦(xia)(xia)(xia)苗(miao)(miao)早期是最適合的(de)餌料，如(ru)果培(pei)育(yu)(yu)(yu)得(de)當，不(bu)僅可以節(jie)約(yue)成本，減少育(yu)(yu)(yu)苗(miao)(miao)水體(ti)環境負荷，尤其是對(dui)于蝦(xia)(xia)(xia)苗(miao)(miao)的(de)發育(yu)(yu)(yu)打下堅實的(de)基礎(chu)，提高(gao)成活(huo)率(lv)。結合個人的(de)育(yu)(yu)(yu)苗(miao)(miao)感受，投喂(wei)單(dan)胞(bao)藻(zao)與不(bu)投喂(wei)的(de)區別(bie)還是有(you)的(de)，比如(ru)苗(miao)(miao)的(de)變態(tai)時間縮短，活(huo)力(li)個頭大(da)小，水質(zhi)均(jun)優于未投喂(wei)單(dan)胞(bao)藻(zao)的(de)苗(miao)(miao)，當然(ran)如(ru)果培(pei)育(yu)(yu)(yu)不(bu)得(de)當，反作用(yong)(yong)也有(you)，比如(ru)投喂(wei)有(you)害菌超標的(de)藻(zao)液(ye)，藻(zao)類老化，投喂(wei)過量(liang)等。所以合理運用(yong)(yong)，方(fang)可收到理想效(xiao)果。限于個人水平，描述方(fang)法(fa)的(de)錯誤不(bu)足之處(chu)，懇請(qing)大(da)家指正。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超凈工作臺
使用前提前開機，打開紫外線(xian)燈(deng)和(he)風機開關20分(fen)鐘(zhong)。超凈臺面上不存放不必(bi)要(yao)的物品，保持(chi)工(gong)(gong)作(zuo)區(qu)內(nei)(nei)的凈化氣(qi)流(liu)(liu)不受干擾(rao)，工(gong)(gong)作(zuo)時(shi)盡量避免作(zuo)明顯干擾(rao)氣(qi)流(liu)(liu)的動作(zuo)；超凈臺保持(chi)光(guang)滑水平(ping)，光(guang)滑便于(yu)用酒(jiu)精消(xiao)毒(du)布擦，水平(ping)是(shi)倒培養基時(shi)使培養皿內(nei)(nei)平(ping)板厚度一致(zhi)。工(gong)(gong)作(zuo)時(shi)超凈臺周圍空氣(qi)流(liu)(liu)動要(yao)緩慢，雜菌盡量減少，所以要(yao)定期(qi)清潔消(xiao)毒(du)保種(zhong)室(shi)內(nei)(nei)，關閉門窗(chuang)，盡可能(neng)減少雜菌數量；空氣(qi)過濾網定期(qi)清潔。
（2）真(zhen)空泵和溶劑過(guo)濾(lv)器(qi)及過(guo)濾(lv)膜
此環節過濾只(zhi)是為單(dan)胞(bao)藻純(chun)培(pei)養室(shi)（保種，提(ti)純(chun)，擴(kuo)培(pei)試管(guan)級）準備清(qing)潔無(wu)菌(jun)海水。其他級別的培(pei)養無(wu)需此環節。
過(guo)(guo)(guo)濾膜使用(yong)0.2微(wei)米孔徑(jing)，不可用(yong)手拿，用(yong)鑷子選(xuan)取(qu)。真空泵與溶劑過(guo)(guo)(guo)濾器之間(jian)通過(guo)(guo)(guo)合適口(kou)(kou)徑(jing)的(de)橡膠管連接緊密，每次(ci)過(guo)(guo)(guo)濾要(yao)注意(yi)濾膜的(de)過(guo)(guo)(guo)濾效(xiao)果，防止濾孔阻塞(sai)影響過(guo)(guo)(guo)濾效(xiao)果。濾瓶內的(de)濾液(ye)不能(neng)沒過(guo)(guo)(guo)濾板出水(shui)口(kou)(kou)，否則濾液(ye)將被抽吸入真空泵，導致真空泵損壞。
應該使濾板內的營(ying)養液過(guo)濾盡后（無水滴）才能停泵(beng)。要定期注(zhu)意(yi)真(zhen)空泵(beng)內油量，注(zhu)意(yi)加(jia)油。
(3) 恒溫鼓(gu)風干燥箱
設定溫(wen)(wen)度(du)(du)時。先(xian)按(an)控溫(wen)(wen)儀功能鍵(jian)SET進入(ru)(ru)溫(wen)(wen)度(du)(du)設定狀態，此時SP設定顯示一閃(shan)(shan)一閃(shan)(shan)，要(yao)按(an)移(yi)動位鍵(jian)配合加(jia)(jia)鍵(jian)或減鍵(jian)，設定時先(xian)從分位數(shu)(shu)字設定，一直(zhi)到百位數(shu)(shu)，設定結束需(xu)按(an)一下功能鍵(jian)SET,此時干燥箱進入(ru)(ru)升溫(wen)(wen)狀態，加(jia)(jia)熱(re)指(zhi)示燈亮，當箱內(nei)溫(wen)(wen)度(du)(du)接近設定溫(wen)(wen)度(du)(du)時，加(jia)(jia)熱(re)指(zhi)示燈閃(shan)(shan)動多次，控制進入(ru)(ru)恒(heng)溫(wen)(wen)狀態。
使用注意(yi)事項：物(wu)(wu)品(pin)不(bu)能(neng)堆得太(tai)滿，更不(bu)能(neng)堵住出風口(kou)，以免影響溫(wen)度(du)均勻上升(sheng)。若是(shi)有牛皮(pi)紙和保(bao)鮮膜(mo)時，溫(wen)度(du)不(bu)能(neng)超過180度(du)。取出物(wu)(wu)品(pin)時，箱內(nei)外溫(wen)差不(bu)宜過高，防止玻璃(li)器(qi)皿(min)炸裂。橡(xiang)膠制品(pin)不(bu)能(neng)放入。
（4）加濕器
配合生化(hua)培養箱使用(yong)。
水(shui)源(yuan)是蒸餾水(shui)；不(bu)應容器(qi)內帶水(shui)移動加濕器(qi)；加水(shui)時應在容器(qi)上表示的滿水(shui)線為止。
應注(zhu)意的(de)事項(xiang)：平時(shi)留意觀察水箱的(de)存水量，及時(shi)予以(yi)補充，遠離(li)熱源，腐蝕物。
（5）蒸(zheng)汽消毒器
容器加水時(shi)，水位一定要超過(guo)電(dian)(dian)熱管，最好(hao)是到3個支撐點的(de)(de)下緣，如果連續使(shi)用，應在每(mei)次消毒(du)前補足(zu)蒸發水量，不然少水會燒壞電(dian)(dian)熱管。蓋(gai)上的(de)(de)放(fang)(fang)(fang)氣軟管插(cha)入(ru)消毒(du)桶圓槽內(nei)，對(dui)正蓋(gai)和主體(ti)的(de)(de)螺栓槽，依(yi)次將(jiang)(jiang)相對(dui)方(fang)的(de)(de)翼型螺母(mu)予以旋緊(jin)，使(shi)蓋(gai)與主體(ti)密合，加熱開(kai)始時(shi)，應將(jiang)(jiang)放(fang)(fang)(fang)氣閥與安全閥的(de)(de)小(xiao)手(shou)柄(bing)扳至(zhi)垂(chui)直放(fang)(fang)(fang)氣方(fang)位，必須待有較(jiao)急蒸汽(qi)噴出，即將(jiang)(jiang)小(xiao)手(shou)柄(bing)扳回(hui)水平“關閉(bi)”方(fang)位。
當(dang)到達所需壓力(li)和溫度，計(ji)算消(xiao)毒時(shi)間，消(xiao)毒畢后(hou)，關(guan)閉電源，待壓力(li)指針指向0時(shi)，將放(fang)(fang)氣(qi)閥的小手柄(bing)扳至垂直放(fang)(fang)氣(qi)方(fang)位(wei)，氣(qi)放(fang)(fang)完后(hou)，打開容器蓋。物品消(xiao)毒后(hou)要迅(xun)速干燥。
應(ying)注意滅菌液體時，不(bu)超過盛液體容器體積的(de)(de)3/4，瓶塞(sai)(sai)(sai)不(bu)可(ke)(ke)用(yong)軟木(mu)塞(sai)(sai)(sai)或未(wei)打孔的(de)(de)橡膠塞(sai)(sai)(sai)。滅菌器內冷(leng)空(kong)氣(qi)必須(xu)完全(quan)(quan)排除。因為空(kong)氣(qi)的(de)(de)膨脹壓(ya)大于(yu)水蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)的(de)(de)膨脹壓(ya)，當水蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)含(han)冷(leng)空(kong)氣(qi)時，壓(ya)力表所(suo)表示(shi)的(de)(de)壓(ya)力是水蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)壓(ya)力和部分冷(leng)空(kong)氣(qi)壓(ya)力之和，不(bu)是水蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)的(de)(de)實(shi)際(ji)壓(ya)力，而(er)同一(yi)壓(ya)力下的(de)(de)實(shi)際(ji)溫度，含(han)空(kong)氣(qi)的(de)(de)蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽低于(yu)飽和蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽，這樣導致達不(bu)了消(xiao)毒效(xiao)果(guo)。絕不(bu)可(ke)(ke)堵塞(sai)(sai)(sai)安(an)全(quan)(quan)閥出氣(qi)孔，必須(xu)留空(kong)位保(bao)證其暢通放(fang)氣(qi)，發現超溫超壓(ya)，立即斷電。
蒸餾器
先(xian)關閉放水(shui)(shui)(shui)閥，打開(kai)進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，待(dai)溢水(shui)(shui)(shui)皮(pi)(pi)管(guan)(guan)有水(shui)(shui)(shui)流出(chu)，方可接通電源，此時可暫時關閉進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，待(dai)出(chu)水(shui)(shui)(shui)皮(pi)(pi)管(guan)(guan)有蒸(zheng)餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)流出(chu)，打開(kai)進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，制備蒸(zheng)餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)。定期(qi)清洗蒸(zheng)餾(liu)(liu)器內壁，除(chu)去水(shui)(shui)(shui)垢，不(bu)然影(ying)響蒸(zheng)餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)質量和使用效果。切(qie)不(bu)可關閉水(shui)(shui)(shui)閥制備蒸(zheng)餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)，否則燒壞電熱管(guan)(guan)。
（6）鼓風機
定(ding)期(qi)更換(huan)吸氣口的過濾棉，異常情況，請電工(gong)檢查。
（7）空(kong)調
保種室若(ruo)有生長藻(zao)種，需(xu)維持(chi)恒(heng)定溫度，反(fan)之關閉。一級，二級空調(diao)視外(wai)界氣(qi)溫調(diao)整(zheng)開關。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾(lv)水(shui)筒式過(guo)濾(lv)器。筒式過(guo)濾(lv)器的濾(lv)芯應用(yong)(yong)一次更(geng)換一次，用(yong)(yong)過(guo)的濾(lv)芯浸泡(pao)在1%鹽(yan)酸溶液(ye)中消毒12h以上。然后用(yong)(yong)洗潔精清(qing)洗，再(zai)用(yong)(yong)足量(liang)清(qing)水(shui)沖洗干凈，晾干備用(yong)(yong)。（濾(lv)芯規格(ge)應小于(yu)等(deng)于(yu)0.5微米(mi)）。
2、試(shi)管(guan)(guan)（規格10毫(hao)升到20毫(hao)升），錐形瓶（50毫(hao)升到200毫(hao)升），500ml錐形瓶，2.5L瓶廣口(kou)瓶，移液管(guan)(guan)，移液槍管(guan)(guan)/盒，玻(bo)璃(li)氣(qi)(qi)(qi)管(guan)(guan)，膠(jiao)氣(qi)(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)(qi)石，溶劑過濾器(qi)(qi)，培養皿(min)。用(yong)(yong)過后(hou)應當用(yong)(yong)清(qing)水清(qing)洗后(hou)浸泡(pao)于1% 鹽酸12h以上（溶劑過濾器(qi)(qi)除外(wai)，浸泡(pao)時相(xiang)(xiang)近大小器(qi)(qi)皿(min)分類(lei)放(fang)不(bu)同的消毒桶，規格相(xiang)(xiang)差(cha)大，易導(dao)致相(xiang)(xiang)互碰(peng)撞碎爛）然后(hou)用(yong)(yong)洗潔(jie)精清(qing)洗(用(yong)(yong)毛刷清(qing)洗試(shi)管(guan)(guan)底(di)部時，不(bu)可(ke)太(tai)用(yong)(yong)力，否則(ze)底(di)部易破裂)，再(zai)用(yong)(yong)大量清(qing)水沖洗干凈(jing)，風干或(huo)曬干，高(gao)壓滅菌后(hou)，放(fang)入恒溫干燥箱（膠(jiao)氣(qi)(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)(qi)石除外(wai)）干燥備用(yong)(yong)。
3、聚(ju)乙烯藻(zao)(zao)袋用于(yu)(yu)二級藻(zao)(zao)類藻(zao)(zao)種(zhong)掛袋培養或3級擴培（一(yi)般使用盛裝(zhuang)藻(zao)(zao)液12升(sheng)左右(you)）。先用清(qing)水沖(chong)洗干(gan)凈內外，浸泡于(yu)(yu)1% 鹽酸12h以上，再用大(da)量清(qing)水沖(chong)洗干(gan)凈，風干(gan)或曬干(gan)，備用。由于(yu)(yu)藻(zao)(zao)袋近似密封性，對于(yu)(yu)防(fang)止微生物污染(ran)有很好的效果(guo)。
4、毛(mao)(mao)巾、保種室，一級(ji)(ji)和(he)二級(ji)(ji)毛(mao)(mao)巾不可混用(yong)(yong)(yong)，所用(yong)(yong)(yong)毛(mao)(mao)巾后(hou)都應消毒清洗晾干后(hou)備(bei)用(yong)(yong)(yong)。
5、錫箔(bo)紙：除(chu)非粘上油污或污物以及破損，都應(ying)重復使用。
6、牛皮紙：定期拿到烘箱烘干。
7、定期更換空氣過濾器(qi)（用于1，2級(ji)培養(yang)的(de)(de)進氣過濾）的(de)(de)濾芯，濾芯已油化或(huo)沖散(san)的(de)(de)棄去。
8、定期更(geng)換鼓風機進風口(kou)的(de)過濾棉(mian)。
9、對新購入(ru)的器皿應先(xian)除去(qu)包(bao)裝沾染的污垢后，用(yong)洗潔(jie)精刷(shua)洗，流水(shui)沖凈，再浸泡于1%的鹽酸12h，使游離的堿性物質除去(qu)，再用(yong)清水(shui)沖洗干凈，風(feng)干或曬(shai)干備用(yong)。
室內衛生消毒
1、保(bao)種(zhong)室每天早上(shang)用清水擦洗實驗臺面，地(di)板(ban)，墻(qiang)壁(bi)，木架后，開紫外(wai)燈消毒(du)20分鐘(zhong)，此(ci)時關(guan)掉空調，關(guan)掉日光燈，由于紫外(wai)燈照射會產(chan)生(sheng)一定量的臭氧，對(dui)人體有害，所以消毒(du)關(guan)閉紫外(wai)燈后人應隔一段(duan)時間再(zai)進去(qu)。進保(bao)種(zhong)室換鞋。
2、一級和二級室每(mei)天清潔(jie)，接種前接種后承載物框架都應用消毒(du)液消毒(du)。
3、門(men)口消毒池定期(qi)更換消毒藥水（高錳(meng)酸鉀(jia)）。
4、常用消毒劑濃度(du) 1%鹽(yan)酸，次氯酸鈉20ppm（有效氯），碘液(ye)（1000ppm）,酒精(jing)70-75%,高錳酸鉀1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所需燒(shao)(shao)(shao)杯，玻(bo)棒須(xu)清洗(xi)干凈(jing)，錐形(xing)瓶和培養(yang)皿須(xu)消毒(du)清洗(xi)滅菌烘干。將稱好的(de)純化瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂(zhi)粉(fen)加(jia)入燒(shao)(shao)(shao)杯再加(jia)入一(yi)定(ding)量的(de)海水，加(jia)熱(re)（必須(xu)不停攪拌，以免瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂(zhi)糊底燒(shao)(shao)(shao)焦(jiao)）至完全(quan)融化，加(jia)熱(re)后的(de)瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂(zhi)培養(yang)基(ji)應當透明無顯著沉淀，若明顯，可采用(yong)清潔(jie)的(de)白色薄(bo)絨布或中間(jian)夾有(you)薄(bo)層吸水棉(mian)的(de)雙(shuang)層紗布鋪(pu)在(zai)漏斗上趁(chen)熱(re)過濾，融化畢(bi)后精確(que)加(jia)入營養(yang)鹽（維生素B溶液須(xu)等培養(yang)基(ji)高壓滅菌后冷卻至50攝氏(shi)度以下再加(jia)）。
培(pei)養基(ji)采用(yong)121攝(she)氏度高壓蒸汽滅菌20至30分鐘(zhong)即可，培(pei)養基(ji)滅菌后應立即取(qu)出，冷卻至50攝(she)氏度以下，即加(jia)維生(sheng)素B溶(rong)液。將盛裝培(pei)養基(ji)的錐形(xing)瓶和培(pei)養皿(min)放在超凈(jing)工作臺上，點燃(ran)酒精(jing)燈，右手托起錐形(xing)瓶底，將瓶口在酒精(jing)燈稍(shao)加(jia)燒，然后迅速(su)將培(pei)養基(ji)倒(dao)入培(pei)養皿(min)中，以鋪滿(man)皿(min)底為止（厚(hou)薄適中）。鋪放好后，放置20-30分鐘(zhong)，待培(pei)養基(ji)凝固后，即開始操作。
若是做斜面(mian)培養基，則加入(ru)維(wei)生素B溶液后，將盛裝培養基的(de)錐(zhui)形(xing)瓶和試管以及(ji)一根厚約(yue)1厘(li)米的(de)小木板放(fang)在超凈(jing)工作(zuo)臺上。分裝約(yue)為試管高度的(de)1/3-2/3（視情況操作(zuo)），分裝量應(ying)(ying)以能形(xing)成2/3底層和1/3斜面(mian)量為好(hao)，擺(bai)置(zhi)成適當斜面(mian)，待其自然凝固。培養基制(zhi)備好(hao)后，如發現破裂，水(shui)分浸入(ru)，色澤異常等均應(ying)(ying)棄去.
待(dai)凝固后(hou)即進行操作，現一(yi)般采(cai)用平板劃(hua)線接種(zhong)和涂布接種(zhong)。
平板劃線接種
接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)在(zai)酒精燈(deng)火(huo)焰(yan)(yan)上充分燒紅后(hou)，接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)柄一邊(bian)(bian)轉動(dong)一邊(bian)(bian)慢慢來回通過(guo)火(huo)焰(yan)(yan)3次，待冷卻至室(shi)溫方(fang)可挑取藻(zao)種(zhong)(zhong)（為保證藻(zao)種(zhong)(zhong)不被燙(tang)死，挑種(zhong)(zhong)前(qian)可將(jiang)接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)接(jie)(jie)觸(chu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)內(nei)壁(bi)或(huo)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)），迅速接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)至新(xin)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)（劃(hua)(hua)線可采用(yong)斜線法(fa)，方(fang)格法(fa)，曲線法(fa)，放(fang)射法(fa)等）。左手(shou)(shou)握住(zhu)平板，用(yong)大(da)拇指和食指稍稍抬起皿(min)(min)蓋，同(tong)時(shi)靠近火(huo)焰(yan)(yan)周圍，右(you)手(shou)(shou)持接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)伸入(ru)皿(min)(min)內(nei)，在(zai)平板上一個(ge)區(qu)域作(zuo)(zuo)劃(hua)(hua)線（依方(fang)法(fa)不同(tong)，動(dong)作(zuo)(zuo)不同(tong)）。劃(hua)(hua)線時(shi)使(shi)(shi)接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)與平板表(biao)面(mian)(mian)成30-40度角輕輕接(jie)(jie)觸(chu)，以腕力在(zai)表(biao)面(mian)(mian)作(zuo)(zuo)較(jiao)快的滑(hua)動(dong)（注意不要(yao)劃(hua)(hua)破平板表(biao)面(mian)(mian)或(huo)伸進培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)內(nei)）。接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)挑種(zhong)(zhong)后(hou)和劃(hua)(hua)線完(wan)抽出時(shi)均不可碰及皿(min)(min)壁(bi)/口，更不能(neng)碰其它物體和臺面(mian)(mian)。接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)完(wan)后(hou)，將(jiang)接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)從(cong)柄部至環(huan)端逐(zhu)漸通過(guo)酒精燈(deng)火(huo)焰(yan)(yan)滅菌(jun)，不能(neng)直接(jie)(jie)燒環(huan)，以免殘留(liu)在(zai)接(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)上的藻(zao)體或(huo)菌(jun)體爆濺污染空(kong)間(jian)。上述操作(zuo)(zuo)完(wan)成后(hou)，即用(yong)無菌(jun)封(feng)口膜(mo)封(feng)培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)口（膜(mo)使(shi)(shi)用(yong)前(qian)須用(yong)酒精消毒(du)，紫外燈(deng)消毒(du)，風干），封(feng)口時(shi)，用(yong)左手(shou)(shou)大(da)拇指摁住(zhu)膜(mo)一邊(bian)(bian)末端，右(you)手(shou)(shou)大(da)拇指和食指捏(nie)住(zhu)另一邊(bian)(bian)末端，迅速繞培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)口繞一圈，封(feng)口。
涂(tu)布(bu)接種(zhong)
所用種液(ye)必(bi)須經(jing)過弧菌檢測合格(ge)后方可使用。涂(tu)布(bu)棒(bang)在火焰(yan)上(shang)(shang)慢慢來回過火焰(yan)3次，冷(leng)卻（不可驟冷(leng)），將(jiang)種液(ye)用移液(ye)槍從試(shi)管(guan)吸出(chu)注入平板(ban)上(shang)(shang)面（槍管(guan)不可碰及(ji)試(shi)管(guan)外(wai)壁，更(geng)不能碰及(ji)其它物品(pin)或臺面），迅速用涂(tu)布(bu)棒(bang)在表(biao)面作來回左右的涂(tu)布(bu)，讓藻液(ye)分布(bu)均勻(yun)，畢后，封口(kou)同平板(ban)劃線。
試管液體培養基接種
所(suo)用種(zhong)液(ye)必(bi)須經(jing)過弧菌(jun)檢(jian)測合格后方可使(shi)用。火(huo)焰(yan)滅(mie)(mie)菌(jun)前試(shi)管(guan)(guan)口(kou)外壁(bi)不(bu)能(neng)有(you)水滴(di)（易導致受熱不(bu)均而破裂）,燒試(shi)管(guan)(guan)口(kou)時(shi)，試(shi)管(guan)(guan)傾斜45度角，不(bu)斷移動試(shi)管(guan)(guan)，使(shi)試(shi)管(guan)(guan)口(kou)受熱均勻(yun)，滅(mie)(mie)菌(jun)時(shi)間3秒左右。滅(mie)(mie)菌(jun)后不(bu)能(neng)驟冷，防止試(shi)管(guan)(guan)破裂。畢后，用盛裝營(ying)養(yang)液(ye)150或200ml的錐形(xing)瓶（也要(yao)滅(mie)(mie)菌(jun)瓶口(kou)）向試(shi)管(guan)(guan)中傾倒營(ying)養(yang)液(ye)，每次只能(neng)拿(na)一個試(shi)管(guan)(guan)（注：若幾(ji)個試(shi)管(guan)(guan)對(dui)比(bi)時(shi)，可以同(tong)時(shi)拿(na)在手(shou)里，用大拇指(zhi)和手(shou)掌），倒好后，同(tong)樣試(shi)管(guan)(guan)和錐形(xing)瓶口(kou)滅(mie)(mie)菌(jun)，試(shi)管(guan)(guan)塞(sai)也要(yao)滅(mie)(mie)菌(jun)，塞(sai)試(shi)管(guan)(guan)塞(sai)時(shi)不(bu)要(yao)移動試(shi)管(guan)(guan)迎接塞(sai)，以免試(shi)管(guan)(guan)在移動中納入可能(neng)含菌(jun)空氣，火(huo)焰(yan)旁為(wei)無菌(jun)。
所(suo)有試管(guan)(guan)分裝好后(hou)，即(ji)接種。用移液(ye)槍選(xuan)取(qu)移液(ye)量（試管(guan)(guan)口滅菌），注入新培(pei)養(yang)基，槍管(guan)(guan)不(bu)(bu)(bu)可碰及(ji)管(guan)(guan)外(wai)壁，更不(bu)(bu)(bu)能碰及(ji)其它物品或臺(tai)面，一(yi)支槍管(guan)(guan)只能和(he)同一(yi)種液(ye)使(shi)用，選(xuan)取(qu)另一(yi)試管(guan)(guan)種液(ye)時必須更換槍頭。接種畢后(hou)，選(xuan)取(qu)合適光(guang)照溫度培(pei)養(yang)。由于試管(guan)(guan)培(pei)養(yang)是靜置培(pei)養(yang)，而(er)在靜置條件下，藻(zao)細胞(bao)會(hui)聚集在試管(guan)(guan)底部，且藻(zao)細胞(bao)周圍會(hui)形成透過養(yang)分的(de)屏障，營養(yang)鹽(yan)的(de)攝入受(shou)阻(zu)，光(guang)照吸收不(bu)(bu)(bu)均，為使(shi)營養(yang)鹽(yan)攝入正常(chang)，藻(zao)細胞(bao)受(shou)光(guang)均勻，需要定時搖(yao)置試管(guan)(guan)（手先噴(pen)消毒酒精，手腕使(shi)勁搖(yao)，不(bu)(bu)(bu)要擺臂，不(bu)(bu)(bu)能倒置搖(yao)）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三角瓶(ping)接種(zhong)需(xu)(xu)(xu)無菌操作。500ml瓶(ping)，2.5L瓶(ping)液體(ti)培(pei)養(yang)基接種(zhong)均在室內衛生條(tiao)件下(xia)操作。3種(zhong)瓶(ping)和所需(xu)(xu)(xu)營(ying)養(yang)液及錫紙，移液管，洗(xi)耳球，氣管，氣石均需(xu)(xu)(xu)經(jing)消毒(du)清洗(xi)，滅菌后使(shi)用。三角瓶(ping)需(xu)(xu)(xu)定時搖置，500ml，2.5L瓶(ping)培(pei)養(yang)在通氣條(tiao)件下(xia)培(pei)養(yang)。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣(qi)(qi)管(guan)，氣(qi)(qi)石均(jun)需經消(xiao)毒(du)清(qing)洗，滅菌后使(shi)用(yong)，抽藻管(guan)前次用(yong)畢(bi)后應當用(yong)水(shui)泵(beng)將管(guan)內灌(guan)滿消(xiao)毒(du)鹽酸溶液，今次用(yong)前需用(yong)海(hai)水(shui)或(huo)淡水(shui)沖洗干凈后使(shi)用(yong)。選取的(de)(de)種液應當是(shi)無明顯沉(chen)淀，泡沫，原生(sheng)動物，附著物，色澤正常，藻細胞(bao)密(mi)度大，形態正常，弧(hu)菌檢(jian)測合格后選用(yong)。所(suo)用(yong)海(hai)水(shui)漂(piao)(piao)(piao)白水(shui)消(xiao)毒(du)有效氯(lv)應足10ppm，曝(pu)氣(qi)(qi)12小時(shi)，檢(jian)測余氯(lv)，加硫代硫酸鈉中和(he)，方可使(shi)用(yong)。若(ruo)使(shi)用(yong)稀釋(shi)(shi)的(de)(de)漂(piao)(piao)(piao)白水(shui)，應當天配制(zhi)當天使(shi)用(yong)，而未使(shi)用(yong)的(de)(de)要(yao)在24小時(shi)后棄去(qu)。且稀釋(shi)(shi)的(de)(de)漂(piao)(piao)(piao)白水(shui)必須加蓋放(fang)在避光的(de)(de)容(rong)器內保存。由于漂(piao)(piao)(piao)白水(shui)會隨時(shi)間漸漸分(fen)解，一次性購入的(de)(de)漂(piao)(piao)(piao)白水(shui)不應太多，不要(yao)過量儲存，以免影響(xiang)滅菌功(gong)效。
1,2，3級接藻示意
試管→三(san)角瓶(ping)→500ml瓶(ping)子(zi)→2500ml瓶(ping)子(zi)→20升的藻種聚(ju)乙(yi)烯(xi)袋(dai) →18升的擴培(pei)藻聚(ju)乙(yi)烯(xi)袋(dai)或者培(pei)藻池
相關說明
1、母液(ye)(ye)的配(pei)置(zhi)可以(yi)參考教科書(shu)上(shang)所寫，然后(hou)結(jie)合當(dang)地的水(shui)質適當(dang)修改即可。氮，磷，鐵元(yuan)素，維生素B1,B12是(shi)必須使用,維生素母液(ye)(ye)保存于低溫弱光環境下(xia)，其中維生素的添加需要先(xian)高壓滅菌(jun)(jun)后(hou)再(zai)加入(ru)母液(ye)(ye)中。其余營養鹽先(xian)配(pei)置(zhi)好后(hou)，再(zai)滅菌(jun)(jun)。如果是(shi)硅藻類，還應加上(shang)硅酸鈉(na)。
2、保(bao)種室所需(xu)營養液(ye)（母液(ye)千分之0.8的比例(li)添加）除需(xu)高壓滅(mie)菌外還必(bi)須(xu)經過真空泵(beng)抽濾(lv)后(hou)才(cai)能用(yong)，微孔濾(lv)膜直徑為50毫米，孔徑為0.2微米。
3、接種比例A:試管(guan)0.07—0.09（隨密度大小(xiao)變化），10毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)試管(guan)加(jia)(jia)營(ying)(ying)養(yang)(yang)液(ye)7毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，藻(zao)種0.5毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，20毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)試管(guan)中營(ying)(ying)養(yang)(yang)液(ye)加(jia)(jia)12.5毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)(yang)液(ye)，1毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)藻(zao)種。B:三角(jiao)瓶(ping)(ping)(ping)0.09-0.11。在100毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，150毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，200毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，250毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)三角(jiao)瓶(ping)(ping)(ping)中分別加(jia)(jia)營(ying)(ying)養(yang)(yang)液(ye)，70，80，120，150毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)（可按一(yi)試管(guan)對應(ying)一(yi)個(ge)三角(jiao)瓶(ping)(ping)(ping)加(jia)(jia)入），C: 500毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)(ping)（400毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)(yang)液(ye)）(按1個(ge)三角(jiao)瓶(ping)(ping)(ping)對應(ying)1個(ge)500毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)(ping)加(jia)(jia)入)D:2.5升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)(ping)（2升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)(yang)液(ye)）（按1個(ge)500毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)(ping)對應(ying)1個(ge)2.5升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)(ping)加(jia)(jia)入），注(zhu)意：上述若發現藻(zao)生長情(qing)況不好(hao)，需要先鏡檢，判斷后再決(jue)定是否接種。
一般情(qing)況下3袋(dai)二級(ji)藻(zao)(zao)種(zhong)應先(xian)擴培(pei)接種(zhong)于(yu)容量400升(sheng)的桶（海水貯備及營養液提前配置好），然(ran)后立即(ji)進行(xing)二級(ji)藻(zao)(zao)袋(dai)擴種(zhong)，每個(ge)聚(ju)乙烯袋(dai)加18升(sheng)左右藻(zao)(zao)水。
4、保種培(pei)養(yang)基制備：按1.5%的(de)比例加(jia)瓊脂粉，煮沸后(hou)加(jia)營養(yang)鹽（母液千分之1添加(jia)），高壓滅菌。維生素需高壓滅菌后(hou)培(pei)養(yang)基冷(leng)卻至30攝(she)氏(shi)度方可(ke)加(jia)入。（可(ke)用劃(hua)線法，涂布法等分離培(pei)養(yang)藻種）。
5、儀器的清(qing)(qing)洗(xi)(xi)(xi)(xi)維(wei)護(hu)。溶劑過濾(lv)器使用后(hou)(hou)(hou)只用洗(xi)(xi)(xi)(xi)潔精和清(qing)(qing)水清(qing)(qing)洗(xi)(xi)(xi)(xi)。高(gao)(gao)壓滅(mie)菌后(hou)(hou)(hou)備用。其它玻璃儀器，氣管，氣石(shi)，移液(ye)槍筒使用后(hou)(hou)(hou)需(xu)要(yao)浸(jin)泡在(zai)百分之一到百分之十(shi)的稀鹽酸溶液(ye)中至少半天，才能拿出清(qing)(qing)洗(xi)(xi)(xi)(xi)，風干，高(gao)(gao)壓滅(mie)菌后(hou)(hou)(hou)備用。
說明(ming)：10的2次方標示(shi)成(cheng)10^2，以下數字的次方通用此表示(shi)法
三級藻生產
三級(ji)藻(zao)系統包(bao)括用水處(chu)理以及配送(song)，溫度與(yu)光(guang)照控(kong)制，藻(zao)種的(de)供應(ying)等。為(wei)確保擴大培養(yang)(yang)成(cheng)功，從接(jie)種到(dao)收獲的(de)培養(yang)(yang)時間應(ying)該盡量縮短，以避免因(yin)為(wei)開(kai)放(fang)式培養(yang)(yang)隨培養(yang)(yang)規模擴大接(jie)觸外界感染源時間加長，三級(ji)藻(zao)池滋生(sheng)過(guo)多的(de)有害生(sheng)物，使三級(ji)培養(yang)(yang)失敗。
1—1高(gao)水(shui)位(wei)低(di)密(mi)(mi)度(du)(du)接(jie)種(zhong)（接(jie)種(zhong)密(mi)(mi)度(du)(du)為P×10^4cell/ml,P為接(jie)種(zhong)密(mi)(mi)度(du)(du)萬(wan)位(wei)數值(zhi)）（未特別(bie)說明藻水(shui)藻細(xi)胞密(mi)(mi)度(du)(du)就是(shi)cell/ml）（以下的推理是(shi)建立(li)在三級(ji)藻第二次加水(shui)和(he)收(shou)獲的密(mi)(mi)度(du)(du)為105級(ji)）
若一天(tian)(tian)(tian)三級濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)(xu)求量為(wei)(wei)A升(sheng)，則總藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)目為(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為(wei)(wei)A升(sheng)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千萬(wan)(wan)位的數(shu)值(zhi)),一般情況下二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的密(mi)度(du)為(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百(bai)萬(wan)(wan)位的數(shu)值(zhi)),若第(di)一天(tian)(tian)(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)，則一天(tian)(tian)(tian)需(xu)(xu)要二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升(sheng)，第(di)三天(tian)(tian)(tian)加水(shui)(shui)(shui)F噸，此時加水(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)第(di)三天(tian)(tian)(tian)加F噸水(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)十(shi)萬(wan)(wan)位數(shu)值(zhi)），然后第(di)五天(tian)(tian)(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總數(shu)目應(ying)(ying)為(wei)(wei)H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)十(shi)萬(wan)(wan)位數(shu),H為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總數(shu)目)，因(yin)為(wei)(wei)總需(xu)(xu)求量的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)目應(ying)(ying)等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總數(shu)目，則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經過計算是(shi)A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若一天需濃縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)320升，則A=320，(一般情況下E和(he)F的(de)值(zhi)接近)，則因(yin)為K=H,所以(yi)320×B=20EZ,即320B=20EZ，E=16B/Z,即B/Z噸藻(zao)(zao)池藻(zao)(zao)水(shui)(shui)可以(yi)收(shou)集濃縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)20升(B為濃縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)密度(du)千(qian)萬(wan)位的(de)數值(zhi),Z為藻(zao)(zao)池藻(zao)(zao)水(shui)(shui)密度(du)十萬(wan)位數)，即若一天需要濃縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)A升，則每天應接種E=AB÷20Z噸水(shui)(shui)。（Z和(he)B的(de)值(zhi)應經(jing)過三級培(pei)養和(he)收(shou)集藻(zao)(zao)水(shui)(shui)后才知道(dao)近似數值(zhi)）。
1—2高水位低(di)密(mi)(mi)度(du)(du)接(jie)(jie)種(zhong)（接(jie)(jie)種(zhong)密(mi)(mi)度(du)(du)為P×10^4cell/ml,P為接(jie)(jie)種(zhong)密(mi)(mi)度(du)(du)萬(wan)位數(shu)值）（未(wei)特別說明(ming)的(de)藻水藻細胞(bao)密(mi)(mi)度(du)(du)就是(shi)cell/ml）（以下的(de)推(tui)理是(shi)建(jian)立(li)在三級藻第二次加水和(he)收獲密(mi)(mi)度(du)(du)為10^6級）。
若(ruo)一天(tian)三(san)級(ji)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)(sheng)，則總(zong)藻(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞數目(mu)(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)(sheng)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)所含(han)的(de)藻(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞數值(zhi)(zhi)(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千萬(wan)位的(de)數值(zhi)(zhi)(zhi)),一般(ban)(ban)情況下二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)種(zhong)的(de)密(mi)度(du)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百萬(wan)位的(de)數值(zhi)(zhi)(zhi)),若(ruo)一天(tian)接種(zhong)E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)，則一天(tian)需(xu)要二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)種(zhong)體積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升(sheng)(sheng)(sheng)，第(di)三(san)天(tian)加(jia)水(shui)F噸(dun)，此(ci)時加(jia)水(shui)后藻(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)第(di)三(san)天(tian)加(jia)F噸(dun)水(shui)之前(qian)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)位數值(zhi)(zhi)(zhi)），然后第(di)五天(tian)收(shou)(shou)獲時，藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞總(zong)數目(mu)(mu)應為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)位數,H為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞總(zong)數目(mu)(mu))，因為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)總(zong)需(xu)求量的(de)藻(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞數目(mu)(mu)應等(deng)于(yu)最(zui)后藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞總(zong)數目(mu)(mu)，則K=H,則 A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經(jing)過(guo)計(ji)算是A×B=(E+F) ×100×Z, (一般(ban)(ban)情況下E和F的(de)值(zhi)(zhi)(zhi)接近(jin)(jin))，則近(jin)(jin)似AB=200EZ, 即若(ruo)一天(tian)需(xu)要濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)A升(sheng)(sheng)(sheng)，則每(mei)天(tian)應接種(zhong)E=AB÷200Z噸(dun)水(shui)。（Z和B的(de)值(zhi)(zhi)(zhi)應經(jing)過(guo)三(san)級(ji)培養和收(shou)(shou)集藻(zao)(zao)(zao)水(shui)后才知道近(jin)(jin)似數值(zhi)(zhi)(zhi)）。
2—1低水位高密度接種（接種密度為P×10^5cell/ml,P為接種密度十萬位數值）（未(wei)特別說明(ming)藻(zao)水藻(zao)細胞密度就是(shi)cell/ml）（以下的推(tui)理是(shi)建立在三級藻(zao)第二次，第三次加水和收獲的密度為105級）。
若一(yi)天(tian)(tian)三級(ji)濃縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求量(liang)(liang)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升，則總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)目(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)A升濃縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)值(zhi)(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)濃縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密度(du)(du)千萬(wan)(wan)位(wei)的(de)數(shu)值(zhi)(zhi)),一(yi)般情況下二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)密度(du)(du)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密度(du)(du)百萬(wan)(wan)位(wei)的(de)數(shu)值(zhi)(zhi)),若第(di)一(yi)天(tian)(tian)接(jie)種E噸(dun)(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)，則一(yi)天(tian)(tian)需要二(er)級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積(ji)d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第(di)二(er)天(tian)(tian)加(jia)水(shui)F噸(dun)(dun)，此時加(jia)水(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密度(du)(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)第(di)二(er)天(tian)(tian)加(jia)F噸(dun)(dun)水(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密度(du)(du)十萬(wan)(wan)位(wei)數(shu)值(zhi)(zhi)），然后第(di)三天(tian)(tian)加(jia)水(shui)G噸(dun)(dun)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞密度(du)(du)應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密度(du)(du)十萬(wan)(wan)位(wei)數(shu))，第(di)四天(tian)(tian)或第(di)五天(tian)(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)目(mu)應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密度(du)(du)十萬(wan)(wan)位(wei)數(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)目(mu))，因為(wei)(wei)(wei)(wei)(wei)總(zong)需求量(liang)(liang)的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)目(mu)應(ying)等(deng)于(yu)最(zui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)目(mu)。
則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經過計算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般(ban)情(qing)況下E,F,G的值接(jie)(jie)近)，則(ze)近似AB=30EW, 即若一天需要濃縮藻A升，則(ze)每天應接(jie)(jie)種(zhong)E=AB÷30W噸水。（W和B的值應經過三(san)級培養和收集(ji)藻水后才知道近似數(shu)值）。
2—2低(di)水(shui)位(wei)高密度(du)接(jie)種（接(jie)種密度(du)為P×10^5cell/ml,P為接(jie)種密度(du)十萬位(wei)數值）（未特別說明藻水(shui)藻細胞密度(du)就是(shi)cell/ml）（以(yi)下的(de)推理是(shi)建立在三(san)級(ji)藻第(di)(di)二(er)次，第(di)(di)三(san)次加水(shui)和收獲的(de)密度(du)為10^6級(ji)）。
若(ruo)一(yi)天(tian)(tian)三級(ji)(ji)濃(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量(liang)為(wei)(wei)A升，則總藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)目為(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)A升濃(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)，B為(wei)(wei)濃(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)千萬位的(de)(de)(de)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)),一(yi)般情況(kuang)(kuang)下二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)(de)(de)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)為(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)百萬位的(de)(de)(de)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)),若(ruo)一(yi)天(tian)(tian)接種E噸(dun)(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)，則一(yi)天(tian)(tian)需(xu)要(yao)二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第二(er)天(tian)(tian)加(jia)水(shui)(shui)F噸(dun)(dun)，此時加(jia)水(shui)(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)第二(er)天(tian)(tian)加(jia)F噸(dun)(dun)水(shui)(shui)之前(qian)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)百萬位數(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)），然后(hou)第三天(tian)(tian)加(jia)水(shui)(shui)G噸(dun)(dun)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)應為(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)百萬位數(shu)(shu)(shu))，第四天(tian)(tian)或第五天(tian)(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總數(shu)(shu)(shu)目應為(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)百萬位數(shu)(shu)(shu),H為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總數(shu)(shu)(shu)目)，因為(wei)(wei)總需(xu)求量(liang)的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)目應等(deng)于最后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)總數(shu)(shu)(shu)目，則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經過(guo)計算是A×B=(E+F+G) ×10×W。(一(yi)般情況(kuang)(kuang)下E,F,G的(de)(de)(de)值(zhi)(zhi)接近)，則近似AB=300EW, 即若(ruo)一(yi)天(tian)(tian)需(xu)要(yao)濃(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升，則每(mei)天(tian)(tian)應接種E=AB÷300W噸(dun)(dun)水(shui)(shui)。（W和B的(de)(de)(de)值(zhi)(zhi)應經過(guo)實地三級(ji)(ji)培養和收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)后(hou)才知道近似數(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)）。
