對蝦(xia)種苗(miao)(miao)(miao)(miao)企(qi)業的(de)(de)(de)生存主要是依靠(kao)蝦(xia)苗(miao)(miao)(miao)(miao)養(yang)殖效(xiao)果(guo)來決定(ding)的(de)(de)(de)，蝦(xia)苗(miao)(miao)(miao)(miao)成活(huo)率(lv)的(de)(de)(de)高低(di)直接影(ying)響著(zhu)產業鏈的(de)(de)(de)上(shang)上(shang)下(xia)下(xia)。單(dan)胞(bao)(bao)藻(zao)(zao)對于(yu)蝦(xia)苗(miao)(miao)(miao)(miao)早期是最適合(he)的(de)(de)(de)餌料，如(ru)果(guo)培育(yu)得當(dang)，不僅(jin)可(ke)(ke)以(yi)節約成本，減(jian)少(shao)育(yu)苗(miao)(miao)(miao)(miao)水體環(huan)境負荷，尤(you)其是對于(yu)蝦(xia)苗(miao)(miao)(miao)(miao)的(de)(de)(de)發育(yu)打下(xia)堅(jian)實的(de)(de)(de)基(ji)礎，提高成活(huo)率(lv)。結合(he)個人的(de)(de)(de)育(yu)苗(miao)(miao)(miao)(miao)感受，投喂(wei)單(dan)胞(bao)(bao)藻(zao)(zao)與不投喂(wei)的(de)(de)(de)區別還(huan)是有的(de)(de)(de)，比如(ru)苗(miao)(miao)(miao)(miao)的(de)(de)(de)變態時間縮短，活(huo)力(li)個頭(tou)大(da)小，水質均優于(yu)未投喂(wei)單(dan)胞(bao)(bao)藻(zao)(zao)的(de)(de)(de)苗(miao)(miao)(miao)(miao)，當(dang)然(ran)如(ru)果(guo)培育(yu)不得當(dang)，反作用也有，比如(ru)投喂(wei)有害菌超標的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)液，藻(zao)(zao)類(lei)老(lao)化(hua)，投喂(wei)過量等。所(suo)以(yi)合(he)理(li)運用，方可(ke)(ke)收到(dao)理(li)想效(xiao)果(guo)。限(xian)于(yu)個人水平，描述方法的(de)(de)(de)錯誤(wu)不足之處，懇請大(da)家指正(zheng)。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超凈工(gong)作臺
使用前提前開機，打開紫(zi)外線燈和風機開關20分鐘。超(chao)(chao)(chao)凈(jing)臺面(mian)上(shang)不存放不必要的(de)物品，保(bao)持(chi)工作(zuo)(zuo)(zuo)(zuo)區內的(de)凈(jing)化氣流(liu)不受干擾，工作(zuo)(zuo)(zuo)(zuo)時(shi)盡(jin)量(liang)避(bi)免作(zuo)(zuo)(zuo)(zuo)明顯干擾氣流(liu)的(de)動作(zuo)(zuo)(zuo)(zuo)；超(chao)(chao)(chao)凈(jing)臺保(bao)持(chi)光滑水(shui)平，光滑便于用酒精消毒(du)布擦，水(shui)平是倒培養(yang)基時(shi)使培養(yang)皿內平板厚度一致。工作(zuo)(zuo)(zuo)(zuo)時(shi)超(chao)(chao)(chao)凈(jing)臺周圍(wei)空(kong)氣流(liu)動要緩慢，雜菌盡(jin)量(liang)減少，所(suo)以要定(ding)期(qi)清潔消毒(du)保(bao)種室內，關閉門窗，盡(jin)可(ke)能減少雜菌數量(liang)；空(kong)氣過(guo)濾(lv)網(wang)定(ding)期(qi)清潔。
（2）真空(kong)泵和溶劑(ji)過濾器及過濾膜
此環節過濾只是為單胞藻純培養(yang)室（保種(zhong)，提純，擴培試管級(ji)）準備(bei)清潔無(wu)菌海水。其(qi)他(ta)級(ji)別的培養(yang)無(wu)需此環節。
過(guo)濾(lv)(lv)膜(mo)使用(yong)0.2微米(mi)孔徑(jing)，不可用(yong)手拿，用(yong)鑷子選(xuan)取。真空(kong)泵與溶劑(ji)過(guo)濾(lv)(lv)器之間(jian)通過(guo)合適(shi)口徑(jing)的橡膠管連接(jie)緊密，每次過(guo)濾(lv)(lv)要注意(yi)濾(lv)(lv)膜(mo)的過(guo)濾(lv)(lv)效果，防止濾(lv)(lv)孔阻塞影響過(guo)濾(lv)(lv)效果。濾(lv)(lv)瓶內的濾(lv)(lv)液不能(neng)沒過(guo)濾(lv)(lv)板出水口，否則濾(lv)(lv)液將被抽吸入(ru)真空(kong)泵，導致真空(kong)泵損壞。
應(ying)該使(shi)濾板內(nei)的營養液過濾盡后（無水滴）才(cai)能停泵(beng)(beng)。要定期注(zhu)意真空泵(beng)(beng)內(nei)油量，注(zhu)意加油。
(3) 恒溫鼓風干燥(zao)箱
設(she)(she)定(ding)溫(wen)(wen)度(du)時。先按(an)控溫(wen)(wen)儀功能(neng)鍵(jian)SET進入(ru)溫(wen)(wen)度(du)設(she)(she)定(ding)狀(zhuang)態，此(ci)時SP設(she)(she)定(ding)顯示(shi)(shi)一閃(shan)一閃(shan)，要按(an)移動位(wei)鍵(jian)配合加(jia)鍵(jian)或減(jian)鍵(jian)，設(she)(she)定(ding)時先從分位(wei)數字(zi)設(she)(she)定(ding)，一直到百位(wei)數，設(she)(she)定(ding)結束(shu)需(xu)按(an)一下(xia)功能(neng)鍵(jian)SET,此(ci)時干(gan)燥箱進入(ru)升溫(wen)(wen)狀(zhuang)態，加(jia)熱指(zhi)示(shi)(shi)燈(deng)亮，當箱內(nei)溫(wen)(wen)度(du)接近設(she)(she)定(ding)溫(wen)(wen)度(du)時，加(jia)熱指(zhi)示(shi)(shi)燈(deng)閃(shan)動多次，控制(zhi)進入(ru)恒溫(wen)(wen)狀(zhuang)態。
使用(yong)注意事項：物(wu)品(pin)不(bu)能(neng)堆得太滿，更不(bu)能(neng)堵住(zhu)出風口，以免影響溫度(du)均勻上(shang)升(sheng)。若是有牛皮紙和保鮮膜時，溫度(du)不(bu)能(neng)超過(guo)180度(du)。取出物(wu)品(pin)時，箱內外(wai)溫差不(bu)宜過(guo)高，防止玻璃器皿炸裂。橡(xiang)膠制品(pin)不(bu)能(neng)放(fang)入。
（4）加濕器
配合生(sheng)化培(pei)養箱使用(yong)。
水(shui)源是蒸餾水(shui)；不應(ying)容(rong)(rong)器(qi)內帶水(shui)移(yi)動加濕器(qi)；加水(shui)時應(ying)在容(rong)(rong)器(qi)上表示(shi)的(de)滿水(shui)線為止。
應注意的事項：平時留意觀察水箱的存水量，及(ji)時予以補(bu)充，遠離熱(re)源，腐蝕物。
（5）蒸(zheng)汽消毒器(qi)
容器加水(shui)時，水(shui)位一定要超(chao)過電熱(re)管，最(zui)好是到3個(ge)支撐點的下緣，如(ru)果連續使用(yong)，應(ying)在每次(ci)消(xiao)毒(du)前補足(zu)蒸發(fa)水(shui)量，不(bu)然(ran)少水(shui)會燒壞電熱(re)管。蓋(gai)上的放(fang)(fang)氣(qi)(qi)軟(ruan)管插(cha)入消(xiao)毒(du)桶圓(yuan)槽(cao)(cao)內，對正(zheng)蓋(gai)和主體的螺栓槽(cao)(cao)，依次(ci)將相對方的翼型(xing)螺母予以旋緊，使蓋(gai)與主體密合，加熱(re)開始時，應(ying)將放(fang)(fang)氣(qi)(qi)閥與安(an)全閥的小手柄(bing)扳至垂(chui)直放(fang)(fang)氣(qi)(qi)方位，必須待有較急蒸汽噴出，即(ji)將小手柄(bing)扳回水(shui)平“關閉(bi)”方位。
當(dang)到達所需壓力(li)和溫度，計算消(xiao)毒時間(jian)，消(xiao)毒畢后，關閉(bi)電源，待(dai)壓力(li)指(zhi)針指(zhi)向0時，將(jiang)放氣(qi)閥的小(xiao)手柄(bing)扳至(zhi)垂直放氣(qi)方位(wei)，氣(qi)放完后，打開容器蓋。物品消(xiao)毒后要迅速(su)干燥。
應注意滅菌液體時，不(bu)超(chao)過盛液體容(rong)器體積(ji)的(de)3/4，瓶塞不(bu)可用(yong)軟木(mu)塞或未(wei)打孔的(de)橡膠塞。滅菌器內冷(leng)空(kong)氣(qi)(qi)(qi)(qi)必須(xu)完全(quan)排除。因為空(kong)氣(qi)(qi)(qi)(qi)的(de)膨脹壓(ya)(ya)(ya)大于水(shui)蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)(qi)(qi)(qi)的(de)膨脹壓(ya)(ya)(ya)，當水(shui)蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)(qi)(qi)(qi)含冷(leng)空(kong)氣(qi)(qi)(qi)(qi)時，壓(ya)(ya)(ya)力(li)表所表示的(de)壓(ya)(ya)(ya)力(li)是水(shui)蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)(qi)(qi)(qi)壓(ya)(ya)(ya)力(li)和(he)部(bu)分(fen)冷(leng)空(kong)氣(qi)(qi)(qi)(qi)壓(ya)(ya)(ya)力(li)之和(he)，不(bu)是水(shui)蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)(qi)(qi)(qi)的(de)實(shi)際壓(ya)(ya)(ya)力(li)，而同一(yi)壓(ya)(ya)(ya)力(li)下的(de)實(shi)際溫度，含空(kong)氣(qi)(qi)(qi)(qi)的(de)蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽低(di)于飽和(he)蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽，這(zhe)樣導致達(da)不(bu)了消毒效果(guo)。絕不(bu)可堵塞安全(quan)閥(fa)出氣(qi)(qi)(qi)(qi)孔，必須(xu)留空(kong)位(wei)保證其(qi)暢通放氣(qi)(qi)(qi)(qi)，發(fa)現超(chao)溫超(chao)壓(ya)(ya)(ya)，立即斷電(dian)。
蒸餾器
先(xian)關閉放水(shui)(shui)閥(fa)(fa)，打開(kai)(kai)進(jin)水(shui)(shui)閥(fa)(fa)，待溢水(shui)(shui)皮(pi)管(guan)有水(shui)(shui)流出(chu)(chu)，方可(ke)接通電(dian)源，此時(shi)(shi)可(ke)暫(zan)時(shi)(shi)關閉進(jin)水(shui)(shui)閥(fa)(fa)，待出(chu)(chu)水(shui)(shui)皮(pi)管(guan)有蒸(zheng)餾(liu)水(shui)(shui)流出(chu)(chu)，打開(kai)(kai)進(jin)水(shui)(shui)閥(fa)(fa)，制(zhi)備蒸(zheng)餾(liu)水(shui)(shui)。定期清(qing)洗蒸(zheng)餾(liu)器(qi)內(nei)壁，除(chu)去(qu)水(shui)(shui)垢(gou)，不(bu)然影響蒸(zheng)餾(liu)水(shui)(shui)質量和使用(yong)效果。切不(bu)可(ke)關閉水(shui)(shui)閥(fa)(fa)制(zhi)備蒸(zheng)餾(liu)水(shui)(shui)，否則燒壞電(dian)熱(re)管(guan)。
（6）鼓風機
定(ding)期更換吸氣(qi)口的過濾棉，異常情況，請電工檢查。
（7）空調
保種(zhong)室若有生長(chang)藻種(zhong)，需維持恒定(ding)溫度，反之關閉(bi)。一級(ji)(ji)，二級(ji)(ji)空(kong)調視外界氣溫調整開關。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾(lv)(lv)水筒式(shi)過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)。筒式(shi)過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)的濾(lv)(lv)芯(xin)(xin)應用(yong)一次更換一次，用(yong)過(guo)的濾(lv)(lv)芯(xin)(xin)浸泡在1%鹽(yan)酸溶液中(zhong)消毒12h以上(shang)。然后(hou)用(yong)洗(xi)(xi)潔(jie)精(jing)清(qing)洗(xi)(xi)，再用(yong)足量清(qing)水沖洗(xi)(xi)干(gan)凈(jing)，晾干(gan)備用(yong)。（濾(lv)(lv)芯(xin)(xin)規格應小于(yu)等于(yu)0.5微米(mi)）。
2、試管(guan)(guan)（規(gui)格(ge)10毫(hao)(hao)升到(dao)20毫(hao)(hao)升），錐(zhui)形瓶(ping)（50毫(hao)(hao)升到(dao)200毫(hao)(hao)升），500ml錐(zhui)形瓶(ping)，2.5L瓶(ping)廣口瓶(ping)，移液管(guan)(guan)，移液槍(qiang)管(guan)(guan)/盒，玻璃氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，膠(jiao)氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石，溶劑過濾(lv)器(qi)，培養皿(min)。用(yong)(yong)過后(hou)應(ying)當用(yong)(yong)清(qing)(qing)水(shui)清(qing)(qing)洗(xi)后(hou)浸泡(pao)于1% 鹽酸12h以上(shang)（溶劑過濾(lv)器(qi)除(chu)外，浸泡(pao)時(shi)相(xiang)近大小器(qi)皿(min)分類放(fang)(fang)不(bu)同的(de)消(xiao)毒桶，規(gui)格(ge)相(xiang)差大，易導致(zhi)相(xiang)互碰(peng)撞碎(sui)爛）然后(hou)用(yong)(yong)洗(xi)潔(jie)精清(qing)(qing)洗(xi)(用(yong)(yong)毛刷(shua)清(qing)(qing)洗(xi)試管(guan)(guan)底(di)部(bu)時(shi)，不(bu)可太用(yong)(yong)力(li)，否則(ze)底(di)部(bu)易破裂)，再用(yong)(yong)大量清(qing)(qing)水(shui)沖洗(xi)干(gan)凈，風干(gan)或曬干(gan)，高壓滅菌后(hou)，放(fang)(fang)入(ru)恒溫干(gan)燥箱（膠(jiao)氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石除(chu)外）干(gan)燥備用(yong)(yong)。
3、聚乙烯藻(zao)袋(dai)用(yong)(yong)于(yu)二級(ji)(ji)藻(zao)類藻(zao)種掛(gua)袋(dai)培(pei)養或(huo)3級(ji)(ji)擴培(pei)（一(yi)般使用(yong)(yong)盛裝藻(zao)液(ye)12升左右）。先用(yong)(yong)清(qing)水沖洗干(gan)(gan)凈(jing)內外(wai)，浸泡(pao)于(yu)1% 鹽酸12h以上(shang)，再用(yong)(yong)大量清(qing)水沖洗干(gan)(gan)凈(jing)，風干(gan)(gan)或(huo)曬干(gan)(gan)，備用(yong)(yong)。由于(yu)藻(zao)袋(dai)近似(si)密封(feng)性，對(dui)于(yu)防止微生(sheng)物(wu)污染有很(hen)好的效果。
4、毛巾、保(bao)種(zhong)室(shi)，一級和二級毛巾不(bu)可混用(yong)，所用(yong)毛巾后都應消毒清洗(xi)晾(liang)干后備用(yong)。
5、錫箔紙：除(chu)非(fei)粘上油污(wu)或污(wu)物以及破損，都應重復使用。
6、牛皮紙：定期拿到烘箱(xiang)烘干。
7、定(ding)期(qi)更換空(kong)氣過(guo)濾器（用于1，2級培養的(de)進氣過(guo)濾）的(de)濾芯(xin)，濾芯(xin)已油化或沖散的(de)棄去。
8、定期更換鼓風(feng)(feng)機進(jin)風(feng)(feng)口的過(guo)濾棉(mian)。
9、對新購入的器皿應先(xian)除去(qu)包裝沾染(ran)的污(wu)垢(gou)后，用洗潔精刷洗，流水沖(chong)凈，再浸泡(pao)于1%的鹽酸(suan)12h，使游離的堿性物質除去(qu)，再用清(qing)水沖(chong)洗干凈，風干或曬干備(bei)用。
室內衛生消毒
1、保種室(shi)每天早上(shang)用清水擦洗實驗臺面(mian)，地板，墻壁(bi)，木(mu)架(jia)后，開(kai)紫(zi)(zi)外燈消毒20分鐘，此(ci)時(shi)(shi)關掉空調，關掉日光燈，由(you)于(yu)紫(zi)(zi)外燈照射會(hui)產生一(yi)(yi)定(ding)量(liang)的臭氧，對人(ren)體有害，所以(yi)消毒關閉紫(zi)(zi)外燈后人(ren)應隔一(yi)(yi)段時(shi)(shi)間再進去。進保種室(shi)換(huan)鞋(xie)。
2、一(yi)級(ji)和(he)二級(ji)室(shi)每(mei)天(tian)清潔，接種前接種后承載物框架都應(ying)用消毒(du)液消毒(du)。
3、門口(kou)消毒池定(ding)期(qi)更換消毒藥水（高錳酸鉀）。
4、常用消毒劑濃(nong)度(du) 1%鹽酸，次氯酸鈉20ppm（有效氯），碘(dian)液（1000ppm）,酒精70-75%,高錳酸鉀1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所需燒杯(bei)(bei)，玻棒須(xu)(xu)清洗干凈，錐形瓶和培養(yang)皿(min)須(xu)(xu)消毒清洗滅(mie)菌(jun)烘干。將稱好的(de)(de)純化(hua)瓊(qiong)(qiong)脂粉加入(ru)(ru)燒杯(bei)(bei)再(zai)加入(ru)(ru)一定量(liang)的(de)(de)海水，加熱（必須(xu)(xu)不停(ting)攪拌，以免瓊(qiong)(qiong)脂糊底燒焦）至(zhi)完(wan)全融(rong)(rong)化(hua)，加熱后的(de)(de)瓊(qiong)(qiong)脂培養(yang)基應(ying)當透明無顯(xian)著沉淀，若(ruo)明顯(xian)，可采(cai)用清潔的(de)(de)白(bai)色薄絨(rong)布或中間夾(jia)有薄層(ceng)吸水棉的(de)(de)雙層(ceng)紗布鋪在漏(lou)斗(dou)上趁熱過濾(lv)，融(rong)(rong)化(hua)畢后精確(que)加入(ru)(ru)營(ying)養(yang)鹽（維(wei)生(sheng)素B溶液須(xu)(xu)等培養(yang)基高壓滅(mie)菌(jun)后冷卻至(zhi)50攝氏度以下再(zai)加）。
培(pei)(pei)養基采用121攝氏度(du)(du)高壓蒸汽滅(mie)菌20至30分(fen)鐘即可，培(pei)(pei)養基滅(mie)菌后應立即取出，冷卻至50攝氏度(du)(du)以下，即加維生(sheng)素B溶(rong)液(ye)。將(jiang)盛裝培(pei)(pei)養基的錐形瓶(ping)和培(pei)(pei)養皿(min)放在超凈工作臺上(shang)，點燃(ran)酒精(jing)(jing)燈，右手托起錐形瓶(ping)底(di)，將(jiang)瓶(ping)口(kou)在酒精(jing)(jing)燈稍(shao)加燒，然(ran)后迅(xun)速將(jiang)培(pei)(pei)養基倒入(ru)培(pei)(pei)養皿(min)中，以鋪(pu)滿皿(min)底(di)為止(zhi)（厚薄適(shi)中）。鋪(pu)放好后，放置20-30分(fen)鐘，待培(pei)(pei)養基凝固后，即開始操作。
若是做斜(xie)(xie)(xie)面(mian)培養基(ji)，則加入(ru)維生(sheng)素(su)B溶液后(hou)，將盛裝(zhuang)培養基(ji)的錐形(xing)瓶和試(shi)管以及一根(gen)厚約(yue)1厘米的小木(mu)板放在超凈工作臺上。分(fen)(fen)裝(zhuang)約(yue)為試(shi)管高度的1/3-2/3（視情況(kuang)操作），分(fen)(fen)裝(zhuang)量(liang)應以能形(xing)成2/3底層和1/3斜(xie)(xie)(xie)面(mian)量(liang)為好，擺置成適當斜(xie)(xie)(xie)面(mian)，待其(qi)自(zi)然凝固(gu)。培養基(ji)制(zhi)備好后(hou)，如發現破(po)裂，水分(fen)(fen)浸入(ru)，色澤異常等均應棄去.
待凝(ning)固后即進行(xing)操作，現一般采(cai)用(yong)平板(ban)劃線接種和涂(tu)布接種。
平板劃線接種
接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環在(zai)(zai)(zai)(zai)酒精(jing)燈(deng)火焰(yan)上充(chong)分燒紅后(hou)，接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)柄(bing)一邊(bian)(bian)轉動(dong)一邊(bian)(bian)慢(man)慢(man)來回通(tong)(tong)過火焰(yan)3次，待冷卻至(zhi)(zhi)室溫方可挑(tiao)(tiao)取(qu)藻(zao)(zao)(zao)種(zhong)(zhong)(zhong)（為保證藻(zao)(zao)(zao)種(zhong)(zhong)(zhong)不(bu)(bu)被(bei)燙死，挑(tiao)(tiao)種(zhong)(zhong)(zhong)前可將接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環接(jie)(jie)(jie)(jie)觸培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)內(nei)(nei)壁(bi)或(huo)(huo)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)），迅速(su)接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)至(zhi)(zhi)新(xin)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)（劃線可采用(yong)斜線法(fa)(fa)(fa)，方格法(fa)(fa)(fa)，曲線法(fa)(fa)(fa)，放射法(fa)(fa)(fa)等）。左手(shou)握住平(ping)板(ban)，用(yong)大拇指和食指稍稍抬起皿(min)蓋，同時(shi)靠(kao)近火焰(yan)周圍(wei)，右(you)手(shou)持接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環伸入皿(min)內(nei)(nei)，在(zai)(zai)(zai)(zai)平(ping)板(ban)上一個區域作(zuo)(zuo)劃線（依方法(fa)(fa)(fa)不(bu)(bu)同，動(dong)作(zuo)(zuo)不(bu)(bu)同）。劃線時(shi)使接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環與平(ping)板(ban)表面成30-40度角(jiao)輕(qing)輕(qing)接(jie)(jie)(jie)(jie)觸，以腕力在(zai)(zai)(zai)(zai)表面作(zuo)(zuo)較快的滑動(dong)（注意不(bu)(bu)要(yao)劃破平(ping)板(ban)表面或(huo)(huo)伸進(jin)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)內(nei)(nei)）。接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環挑(tiao)(tiao)種(zhong)(zhong)(zhong)后(hou)和劃線完抽出時(shi)均(jun)不(bu)(bu)可碰及皿(min)壁(bi)/口，更不(bu)(bu)能(neng)碰其它物體和臺(tai)面。接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)完后(hou)，將接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環從(cong)柄(bing)部至(zhi)(zhi)環端逐漸通(tong)(tong)過酒精(jing)燈(deng)火焰(yan)滅菌(jun)(jun)，不(bu)(bu)能(neng)直接(jie)(jie)(jie)(jie)燒環，以免殘(can)留在(zai)(zai)(zai)(zai)接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環上的藻(zao)(zao)(zao)體或(huo)(huo)菌(jun)(jun)體爆(bao)濺污染空間。上述操作(zuo)(zuo)完成后(hou)，即用(yong)無(wu)菌(jun)(jun)封口膜(mo)封培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)口（膜(mo)使用(yong)前須用(yong)酒精(jing)消毒(du)，紫外(wai)燈(deng)消毒(du)，風(feng)干），封口時(shi)，用(yong)左手(shou)大拇指摁住膜(mo)一邊(bian)(bian)末端，右(you)手(shou)大拇指和食指捏(nie)住另(ling)一邊(bian)(bian)末端，迅速(su)繞培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿(min)口繞一圈(quan)，封口。
涂布(bu)接(jie)種
所用(yong)種液(ye)必須經過(guo)(guo)弧菌檢測合(he)格后(hou)方可(ke)使用(yong)。涂布(bu)棒(bang)在火焰(yan)上慢慢來(lai)回過(guo)(guo)火焰(yan)3次，冷(leng)卻（不可(ke)驟冷(leng)），將種液(ye)用(yong)移(yi)液(ye)槍從試管(guan)(guan)吸出(chu)注入平(ping)板(ban)上面(mian)（槍管(guan)(guan)不可(ke)碰及(ji)試管(guan)(guan)外壁，更不能(neng)碰及(ji)其它物品或臺面(mian)），迅速用(yong)涂布(bu)棒(bang)在表面(mian)作來(lai)回左右(you)的涂布(bu)，讓(rang)藻(zao)液(ye)分布(bu)均勻，畢(bi)后(hou)，封(feng)口(kou)同平(ping)板(ban)劃(hua)線。
試管液體培養基接種
所用種液(ye)必須經過(guo)弧菌(jun)(jun)檢(jian)測合格后(hou)(hou)方可(ke)(ke)使用。火(huo)焰(yan)滅(mie)菌(jun)(jun)前試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)口外壁不能(neng)(neng)有水滴（易導致受熱不均而(er)破裂）,燒試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)口時(shi)，試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)傾斜45度角(jiao)，不斷移(yi)動試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)，使試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)口受熱均勻，滅(mie)菌(jun)(jun)時(shi)間3秒左右。滅(mie)菌(jun)(jun)后(hou)(hou)不能(neng)(neng)驟冷，防止試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)破裂。畢后(hou)(hou)，用盛(sheng)裝營養(yang)液(ye)150或(huo)200ml的錐形瓶(ping)（也(ye)要(yao)(yao)滅(mie)菌(jun)(jun)瓶(ping)口）向試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)中傾倒(dao)(dao)營養(yang)液(ye)，每次只能(neng)(neng)拿一個試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)（注(zhu)：若(ruo)幾個試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)對比時(shi)，可(ke)(ke)以(yi)同(tong)時(shi)拿在手里，用大拇指和(he)手掌），倒(dao)(dao)好(hao)后(hou)(hou)，同(tong)樣試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)和(he)錐形瓶(ping)口滅(mie)菌(jun)(jun)，試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)塞(sai)也(ye)要(yao)(yao)滅(mie)菌(jun)(jun)，塞(sai)試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)塞(sai)時(shi)不要(yao)(yao)移(yi)動試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)迎接塞(sai)，以(yi)免試(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)在移(yi)動中納入可(ke)(ke)能(neng)(neng)含(han)菌(jun)(jun)空氣(qi)，火(huo)焰(yan)旁為無(wu)菌(jun)(jun)。
所有試(shi)(shi)管(guan)分裝好后(hou)，即接(jie)(jie)種(zhong)。用移(yi)液槍(qiang)選(xuan)(xuan)取移(yi)液量(liang)（試(shi)(shi)管(guan)口(kou)滅菌(jun)），注入新培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)，槍(qiang)管(guan)不可碰(peng)及管(guan)外壁，更不能碰(peng)及其它物品(pin)或臺面，一支(zhi)槍(qiang)管(guan)只能和同一種(zhong)液使(shi)(shi)用，選(xuan)(xuan)取另一試(shi)(shi)管(guan)種(zhong)液時必須更換(huan)槍(qiang)頭(tou)。接(jie)(jie)種(zhong)畢后(hou)，選(xuan)(xuan)取合適光(guang)照(zhao)溫度培(pei)(pei)養(yang)(yang)。由于(yu)試(shi)(shi)管(guan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)是(shi)靜(jing)置培(pei)(pei)養(yang)(yang)，而在(zai)靜(jing)置條件下，藻(zao)細胞會聚集在(zai)試(shi)(shi)管(guan)底部，且藻(zao)細胞周圍會形成透過(guo)養(yang)(yang)分的(de)(de)屏障(zhang)，營養(yang)(yang)鹽的(de)(de)攝(she)入受阻，光(guang)照(zhao)吸收不均(jun)，為使(shi)(shi)營養(yang)(yang)鹽攝(she)入正常(chang)，藻(zao)細胞受光(guang)均(jun)勻，需要定(ding)時搖置試(shi)(shi)管(guan)（手先噴消毒酒精，手腕使(shi)(shi)勁搖，不要擺臂，不能倒置搖）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三角(jiao)瓶(ping)接(jie)種(zhong)需(xu)(xu)無菌(jun)操作。500ml瓶(ping)，2.5L瓶(ping)液體(ti)培養基接(jie)種(zhong)均在室內衛(wei)生(sheng)條(tiao)件下操作。3種(zhong)瓶(ping)和所需(xu)(xu)營養液及(ji)錫紙，移液管，洗耳球，氣(qi)管，氣(qi)石(shi)均需(xu)(xu)經消毒清洗，滅菌(jun)后使用。三角(jiao)瓶(ping)需(xu)(xu)定時搖置，500ml，2.5L瓶(ping)培養在通氣(qi)條(tiao)件下培養。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣管(guan)，氣石均需經消毒(du)清(qing)洗，滅菌后使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)，抽藻(zao)管(guan)前次(ci)用(yong)(yong)畢后應(ying)(ying)(ying)(ying)當用(yong)(yong)水(shui)泵將(jiang)管(guan)內灌滿消毒(du)鹽(yan)酸溶液，今次(ci)用(yong)(yong)前需用(yong)(yong)海(hai)水(shui)或淡水(shui)沖洗干凈后使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)。選取的種液應(ying)(ying)(ying)(ying)當是無明顯沉淀，泡(pao)沫，原生動物(wu)，附著物(wu)，色澤正(zheng)常(chang)，藻(zao)細(xi)胞密度大(da)，形態正(zheng)常(chang)，弧菌檢測合格(ge)后選用(yong)(yong)。所用(yong)(yong)海(hai)水(shui)漂(piao)白(bai)(bai)水(shui)消毒(du)有(you)效氯(lv)應(ying)(ying)(ying)(ying)足10ppm，曝氣12小時，檢測余氯(lv)，加(jia)硫代硫酸鈉中和(he)，方可使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)。若使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)稀釋的漂(piao)白(bai)(bai)水(shui)，應(ying)(ying)(ying)(ying)當天(tian)配制(zhi)當天(tian)使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)，而未(wei)使(shi)(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)的要(yao)在(zai)24小時后棄去(qu)。且稀釋的漂(piao)白(bai)(bai)水(shui)必須(xu)加(jia)蓋(gai)放在(zai)避(bi)光的容器(qi)內保存。由于(yu)漂(piao)白(bai)(bai)水(shui)會隨時間漸漸分解，一次(ci)性購(gou)入(ru)的漂(piao)白(bai)(bai)水(shui)不應(ying)(ying)(ying)(ying)太(tai)多，不要(yao)過量(liang)儲存，以免(mian)影(ying)響滅菌功(gong)效。
1,2，3級接藻示意
試管→三角(jiao)瓶(ping)→500ml瓶(ping)子→2500ml瓶(ping)子→20升的(de)藻(zao)種聚(ju)乙(yi)烯(xi)(xi)袋(dai) →18升的(de)擴(kuo)培(pei)藻(zao)聚(ju)乙(yi)烯(xi)(xi)袋(dai)或者培(pei)藻(zao)池
相關說明
1、母(mu)液(ye)的(de)配置(zhi)可(ke)以參考教科書上所寫，然(ran)后(hou)(hou)結(jie)合(he)當(dang)地的(de)水(shui)質適當(dang)修改(gai)即(ji)可(ke)。氮，磷，鐵元素(su)，維(wei)(wei)(wei)生(sheng)素(su)B1,B12是(shi)必須使用,維(wei)(wei)(wei)生(sheng)素(su)母(mu)液(ye)保(bao)存(cun)于低溫弱光環(huan)境下，其中維(wei)(wei)(wei)生(sheng)素(su)的(de)添加(jia)(jia)需(xu)要先高壓滅(mie)菌(jun)后(hou)(hou)再加(jia)(jia)入母(mu)液(ye)中。其余營養鹽先配置(zhi)好后(hou)(hou)，再滅(mie)菌(jun)。如果是(shi)硅(gui)藻類，還應加(jia)(jia)上硅(gui)酸鈉。
2、保(bao)種室(shi)所需(xu)營養液(ye)（母(mu)液(ye)千(qian)分(fen)之0.8的(de)比例添(tian)加(jia)）除需(xu)高壓滅菌外還必須經過(guo)真空泵(beng)抽(chou)濾(lv)(lv)后才能用(yong)，微孔濾(lv)(lv)膜直徑為(wei)50毫米(mi)，孔徑為(wei)0.2微米(mi)。
3、接種(zhong)比例A:試(shi)管(guan)(guan)0.07—0.09（隨密(mi)度大小變化），10毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)試(shi)管(guan)(guan)加營(ying)(ying)養(yang)(yang)液7毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，藻種(zhong)0.5毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，20毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)試(shi)管(guan)(guan)中營(ying)(ying)養(yang)(yang)液加12.5毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)(yang)液，1毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)藻種(zhong)。B:三角瓶(ping)(ping)0.09-0.11。在(zai)100毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，150毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，200毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，250毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)三角瓶(ping)(ping)中分別(bie)加營(ying)(ying)養(yang)(yang)液，70，80，120，150毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)（可按一試(shi)管(guan)(guan)對應(ying)一個(ge)三角瓶(ping)(ping)加入(ru)），C: 500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)（400毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)(yang)液）(按1個(ge)三角瓶(ping)(ping)對應(ying)1個(ge)500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)加入(ru))D:2.5升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)（2升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)(yang)液）（按1個(ge)500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)對應(ying)1個(ge)2.5升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)加入(ru)），注意：上述若發(fa)現藻生(sheng)長情(qing)況不好，需(xu)要先鏡檢(jian)，判斷后再決(jue)定是否接種(zhong)。
一般情況下3袋(dai)二(er)級藻(zao)種(zhong)(zhong)應(ying)先(xian)擴培接(jie)種(zhong)(zhong)于容量400升的(de)桶(tong)（海水貯備及營養液提前配(pei)置(zhi)好(hao)），然后(hou)立即進行(xing)二(er)級藻(zao)袋(dai)擴種(zhong)(zhong)，每個聚乙(yi)烯(xi)袋(dai)加18升左右藻(zao)水。
4、保種(zhong)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基制備：按1.5%的比例加(jia)瓊脂粉，煮沸后加(jia)營養(yang)(yang)(yang)鹽(yan)（母(mu)液(ye)千分(fen)之1添(tian)加(jia)），高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)。維(wei)生素需高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)后培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基冷卻(que)至30攝氏(shi)度方(fang)可加(jia)入(ru)。（可用劃(hua)線法(fa)，涂布法(fa)等(deng)分(fen)離培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)藻種(zhong)）。
5、儀器的清洗維護(hu)。溶(rong)(rong)劑過濾(lv)器使(shi)用(yong)(yong)(yong)后只用(yong)(yong)(yong)洗潔精和清水清洗。高(gao)壓滅(mie)菌(jun)后備(bei)用(yong)(yong)(yong)。其它玻璃儀器，氣管，氣石，移液槍(qiang)筒使(shi)用(yong)(yong)(yong)后需要浸泡在百分之(zhi)(zhi)一到百分之(zhi)(zhi)十(shi)的稀鹽酸溶(rong)(rong)液中至少半天，才能拿出清洗，風干，高(gao)壓滅(mie)菌(jun)后備(bei)用(yong)(yong)(yong)。
說明：10的(de)2次(ci)方(fang)標示成10^2，以下數字的(de)次(ci)方(fang)通(tong)用此(ci)表示法
三級藻生產
三級(ji)藻系統包(bao)括(kuo)用水處理以及配送，溫度與光照控(kong)制，藻種的供應等。為(wei)確保擴大培養(yang)(yang)成功，從(cong)接種到收獲(huo)的培養(yang)(yang)時(shi)間應該盡量縮短，以避免因為(wei)開(kai)放式(shi)培養(yang)(yang)隨(sui)培養(yang)(yang)規模擴大接觸外(wai)界感染源時(shi)間加長(chang)，三級(ji)藻池滋(zi)生過(guo)多的有害生物，使三級(ji)培養(yang)(yang)失敗。
1—1高水位低(di)密度接(jie)種（接(jie)種密度為(wei)P×10^4cell/ml,P為(wei)接(jie)種密度萬位數值(zhi)）（未(wei)特別說(shuo)明藻(zao)(zao)水藻(zao)(zao)細胞密度就是(shi)cell/ml）（以下的推理是(shi)建(jian)立在三級藻(zao)(zao)第(di)二次加水和收獲的密度為(wei)105級）
若一(yi)(yi)天(tian)(tian)三(san)級(ji)(ji)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)(wei)(wei)(wei)A升，則總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)目為(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為(wei)(wei)(wei)(wei)A升濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含(han)的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度千(qian)萬(wan)位的(de)(de)數(shu)值(zhi)),一(yi)(yi)般情況下二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)(zhong)的(de)(de)密(mi)度為(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度百萬(wan)位的(de)(de)數(shu)值(zhi)),若第一(yi)(yi)天(tian)(tian)接種(zhong)(zhong)E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)，則一(yi)(yi)天(tian)(tian)需(xu)要二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)(zhong)體積(ji)d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升，第三(san)天(tian)(tian)加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)F噸(dun)，此時加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)第三(san)天(tian)(tian)加(jia)F噸(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)之前(qian)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度十(shi)萬(wan)位數(shu)值(zhi)），然后第五天(tian)(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)目應為(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度十(shi)萬(wan)位數(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)目)，因為(wei)(wei)(wei)(wei)總(zong)需(xu)求量的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)目應等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)目，則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經(jing)過(guo)計算是(shi)A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若一(yi)天需(xu)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)320升，則(ze)(ze)A=320，(一(yi)般情況下E和(he)F的值(zhi)(zhi)接近)，則(ze)(ze)因為K=H,所以(yi)320×B=20EZ,即(ji)320B=20EZ，E=16B/Z,即(ji)B/Z噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)水(shui)可(ke)以(yi)收(shou)集(ji)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)20升(B為濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)密(mi)度千萬位的數值(zhi)(zhi),Z為藻(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度十萬位數)，即(ji)若一(yi)天需(xu)要濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)A升，則(ze)(ze)每天應接種E=AB÷20Z噸(dun)水(shui)。（Z和(he)B的值(zhi)(zhi)應經過三級(ji)培養和(he)收(shou)集(ji)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)后才知道近似(si)數值(zhi)(zhi)）。
1—2高水位(wei)(wei)低密度接(jie)種(zhong)（接(jie)種(zhong)密度為(wei)(wei)P×10^4cell/ml,P為(wei)(wei)接(jie)種(zhong)密度萬位(wei)(wei)數值）（未特別說明的藻(zao)水藻(zao)細胞密度就是(shi)cell/ml）（以(yi)下的推(tui)理(li)是(shi)建(jian)立在三級(ji)藻(zao)第二次加水和收(shou)獲密度為(wei)(wei)10^6級(ji)）。
若(ruo)一天(tian)(tian)三(san)(san)(san)級(ji)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量為(wei)(wei)(wei)(wei)A升，則總藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)目(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)(wei)A升濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)值(zhi)(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密度千萬(wan)位(wei)的(de)(de)數(shu)值(zhi)(zhi)),一般情況下(xia)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)(de)密度為(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密度百(bai)萬(wan)位(wei)的(de)(de)數(shu)值(zhi)(zhi)),若(ruo)一天(tian)(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)，則一天(tian)(tian)需要二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積(ji)d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升，第(di)(di)三(san)(san)(san)天(tian)(tian)加(jia)水(shui)(shui)F噸，此時加(jia)水(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密度E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)第(di)(di)三(san)(san)(san)天(tian)(tian)加(jia)F噸水(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密度百(bai)萬(wan)位(wei)數(shu)值(zhi)(zhi)），然后第(di)(di)五天(tian)(tian)收獲(huo)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)目(mu)應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密度百(bai)萬(wan)位(wei)數(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)目(mu))，因(yin)為(wei)(wei)(wei)(wei)總需求(qiu)量的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)目(mu)應(ying)等于(yu)最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)目(mu)，則K=H,則 A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經過計(ji)算是A×B=(E+F) ×100×Z, (一般情況下(xia)E和(he)(he)F的(de)(de)值(zhi)(zhi)接近(jin))，則近(jin)似AB=200EZ, 即(ji)若(ruo)一天(tian)(tian)需要濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升，則每天(tian)(tian)應(ying)接種E=AB÷200Z噸水(shui)(shui)。（Z和(he)(he)B的(de)(de)值(zhi)(zhi)應(ying)經過三(san)(san)(san)級(ji)培養(yang)和(he)(he)收集(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)后才知(zhi)道近(jin)似數(shu)值(zhi)(zhi)）。
2—1低水位高密(mi)度接種（接種密(mi)度為P×10^5cell/ml,P為接種密(mi)度十萬位數值）（未特別說明藻水藻細胞密(mi)度就是(shi)cell/ml）（以下的推理是(shi)建立在(zai)三級藻第二次，第三次加水和(he)收獲的密(mi)度為105級）。
若一(yi)天(tian)三(san)(san)級濃縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)(wei)(wei)A升，則總藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)(shu)目為(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)A升濃縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所(suo)含(han)的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)濃縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)千(qian)萬位(wei)(wei)的(de)數(shu)(shu)值(zhi)),一(yi)般(ban)情況下二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)為(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)百萬位(wei)(wei)的(de)數(shu)(shu)值(zhi)),若第(di)(di)(di)一(yi)天(tian)接種E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)，則一(yi)天(tian)需(xu)要二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積(ji)d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第(di)(di)(di)二(er)天(tian)加水(shui)(shui)(shui)(shui)F噸(dun)，此時加水(shui)(shui)(shui)(shui)后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)第(di)(di)(di)二(er)天(tian)加F噸(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)十萬位(wei)(wei)數(shu)(shu)值(zhi)），然后(hou)(hou)第(di)(di)(di)三(san)(san)天(tian)加水(shui)(shui)(shui)(shui)G噸(dun)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)應為(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)十萬位(wei)(wei)數(shu)(shu))，第(di)(di)(di)四天(tian)或(huo)第(di)(di)(di)五天(tian)收(shou)獲(huo)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)總數(shu)(shu)目應為(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)十萬位(wei)(wei)數(shu)(shu),H為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)總數(shu)(shu)目)，因為(wei)(wei)(wei)總需(xu)求量的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)(shu)目應等于(yu)最后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)總數(shu)(shu)目。
則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經過計算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般情況(kuang)下E,F,G的值(zhi)接近(jin))，則近(jin)似AB=30EW, 即若一天需要(yao)濃縮藻A升，則每天應接種E=AB÷30W噸水。（W和B的值(zhi)應經過三級(ji)培養和收集藻水后才知道近(jin)似數值(zhi)）。
2—2低水(shui)位高密度接種（接種密度為(wei)P×10^5cell/ml,P為(wei)接種密度十萬位數值）（未(wei)特別(bie)說明藻(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)細胞密度就是cell/ml）（以下的(de)推理是建立在(zai)三(san)級(ji)藻(zao)(zao)第二(er)次，第三(san)次加(jia)水(shui)和收(shou)獲(huo)的(de)密度為(wei)10^6級(ji)）。
若(ruo)一(yi)天(tian)三(san)級濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量(liang)為(wei)A升，則總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)為(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)A升濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)所(suo)含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)，B為(wei)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千萬(wan)(wan)位(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)),一(yi)般(ban)情況下(xia)(xia)二(er)(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)(zhong)的(de)(de)密(mi)度(du)為(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)二(er)(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百萬(wan)(wan)位(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)),若(ruo)一(yi)天(tian)接(jie)種(zhong)(zhong)E噸(dun)(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)，則一(yi)天(tian)需(xu)要二(er)(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)(zhong)體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第二(er)(er)(er)天(tian)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)F噸(dun)(dun)，此時(shi)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)第二(er)(er)(er)天(tian)加(jia)(jia)F噸(dun)(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)），然后(hou)第三(san)天(tian)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)G噸(dun)(dun)時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)密(mi)度(du)應(ying)(ying)(ying)為(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu))，第四天(tian)或第五天(tian)收獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)應(ying)(ying)(ying)為(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu),H為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu))，因(yin)為(wei)總(zong)需(xu)求量(liang)的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)應(ying)(ying)(ying)等于最后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)，則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經過計算(suan)是A×B=(E+F+G) ×10×W。(一(yi)般(ban)情況下(xia)(xia)E,F,G的(de)(de)值(zhi)(zhi)接(jie)近(jin)(jin))，則近(jin)(jin)似(si)AB=300EW, 即若(ruo)一(yi)天(tian)需(xu)要濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)A升，則每天(tian)應(ying)(ying)(ying)接(jie)種(zhong)(zhong)E=AB÷300W噸(dun)(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)。（W和B的(de)(de)值(zhi)(zhi)應(ying)(ying)(ying)經過實(shi)地三(san)級培養和收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)后(hou)才知道(dao)近(jin)(jin)似(si)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)）。
